蛋白中放射性物质掺入率测定实验_三氯乙酸沉淀法

样品

预冷三氯乙酸乙醇乙醚

Whatman GF-C玻璃纤维膜多功能真空仪（Fisher)20 ml 闪烁瓶闪烁计数器

1. 加入 20 μl 预冷的 10% TCA 停止反应，充分混匀，冰浴 10 min 以沉淀蛋白质。

2. 将样品点在真空仪中的 Whatman GF-C 玻璃纤维膜上，待样品通过膜后用 500 μl 预冷的 5% TCA 洗样品管，并将洗后的液体也点在膜上。

3. 用 5 ml 5% 的预冷 TCA 溶液洗膜 4 次，用 10 ml 95% 的乙醇洗一次，再用 10 ml 乙醚洗 3 次，使膜干燥。

4. 将干燥后的膜放入 20 ml 闪烁瓶，在闪烁计数器中用契仑科夫（Cerenkov）射线计数。

1. 乙醚是易燃品，因此带乙醚操作时必须在通风橱中进行，并远离火源和热源。乙醚洗液应被妥善处理。

2. 如果需对每分钟蜕变次数（dpm）定量，将干燥后的膜放入10 ml 的闪烁液中计数。

3. 膜用 95% 乙醇清洗后可直接用于 Cerenkov 射线计数。假如用此膜进行闪烁计数，乙醚的清洗很重要，因为TCA（可被乙醚洗掉）在闪烁液中可导致强的化学发光，使计数失去意义。