蛋白质—RNA酶中蛋白质消光系数测定—碱水解法

本方法采用碱水解的方法测定RNA酶(R Nase A)的消光系数。适用于蛋白质RNA酶(R Nase A)的测定。 原理：蛋白质的紫外吸收主要来源于色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)等芳香族氨基酸残基。在0.1mol/L的NaOH溶液中蛋白质发生碱性水解,芳香族氨基酸残基的苯酚基团完全离子化,此时Phe的紫外吸收忽略不计,蛋白质溶液可以看作是Tyr和Trp的二元体系，因此，可通过碱水解的方法准确测定蛋白质样品中Tyr和Trp的含量,进而对于已知氨基酸组成，即已知Tyr和Trp的残基数的蛋白质,可以用这一方法推算出蛋白质溶液的浓度。