蛋白质与免疫亲和介质结合实验

仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶

实验步骤

材料与设备

SDS-PAGE 电泳装置

聚丙烯酰胺小胶（10%)

操作程序

1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。

2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAGE 电泳分析，测定核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物与抗体的结合率。

注：游离的σ32 不会与免疫亲和柱结合，而上清中的核心 RNA 聚合酶复合物则可结合, 并可通过上清中核心β'β亚基（在 SDS 胶上，为~155kDa 的双带）的去除来检测。