蛋白质的室温磷光法研究

摘　要　提出了牛血清蛋白(BSA ) 和人血清蛋白(HSA ) 的室温磷光法, 蛋白质的磷光主要来自于包埋于其中的色氨酸残基, 并对影响其室温磷光强度的的各种因素: 如重原子浓度, 酸度, 除氧剂浓度等进行了详细研究, 建立了测定痕量HSA 和BSA 的室温磷光法。该法是以K I 为重原子微扰剂, 在水溶液中用N a2SO3 化学除氧后, 以287nm 为激发波长,BSA 和HSA 在443nm 左右的磷光具有较好的重复性和稳定性。在此条件下它们的线性范围分别为: 1×10- 6—8. 6×10- 5molöL 和3×10- 6—13×10- 5molöL , 检出限分别为: 2. 20×10- 7molöL 和4. 10×10- 7molöL 。同时, 还对它们的光谱性质如荧光、磷光寿命, 偏振等进行了测量。结果显示BSA 中色氨酸残基有两种荧光衰减形式, HSA 则只有一种衰减形式, 它们的磷光属于长寿命磷光, 都能引起光的偏振。