蛋白质测定方法

蛋白质测定方法一般来说，有以下五种：凯氏定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）、紫外吸收法和考马斯亮蓝法（Bradford法）。

表 五种蛋白质测定方法的比较

从以上表格中可以得出，不同的方法有不同的特点和优势，如紫外吸收法测定时间快。但是综合起来，最后一种考马斯亮蓝法(Bradford法)效率最高，无 论是测定时间，灵敏度还是受干扰程度，都是比较占优势的。

下面，我们来重点介绍一下其中一种蛋白质测定方法--凯氏定氮法。

凯氏定氮法（Kjedahl法）

首先将浓硫酸倒入样品中，边倒边摇晃，以使浓硫酸与样品充分接触，然后加热试剂。如果你需要加快实验进度，可以加入CuSO4作催化剂，这样，实验的反应时间就会大大缩短。CH₂COOH和H₂SO₄反应生成氨气，然后氨气又与H₂SO₄发生作用，固定了氮元素。这时我们得到了(NH₄)₂SO₄的溶液，然后我们可以用NaOH去跟硫酸铵反应，通过计算NaOH的使用量，就可以计算出氮的含量。下面是整个定氮法中发生的化学反应。

CH₂COOH+ 3H₂SO₄ = 2CO₂ + 3SO₂ +4H₂O +NH₃    (1)

2NH₃ + H₂SO₄= (NH₄)₂SO₄                       (2)

(NH₄)₂SO₄ + 2NaOH =2H₂O +Na₂SO₄ + 2NH₃        (3)

当我们得到氮的含量以后，我们就可以通过一定的计算，最终算出蛋白质的含量。

凯氏定氮法常用于有机化合物中的氮含量的测定，是蛋白质含量测定的经典方法，虽然在测试过程中，试剂用量很大，但是，不可否认，它所适用的样品范围之广，测试结果之精确，都是公认的。

现在，随着科技的发展，我们已经研究出带消化炉的凯氏定氮仪，它把定氮过程中的前两步骤通过仪器完成，方便了整个过程的实施。凯氏定氮仪能够自动的对样品 进行消化，然后蒸馏，智能化完成，节省了时间和精力，提高了工作效率。这种蛋白质测定方法具有有准确、快速、简便、低耗、稳定的优点。