发布时间:2020-07-01 14:51 原文链接: 蛋白质芯片的原理、分类及一般操作步骤(二)

样品标记法原理图:
 


样品中的蛋白用生物素标记,然后与捕获抗体一起孵育,对照蛋白加入到样品中来监测整个反应过程,包括生物素标记和标准化。结合在芯片上的蛋白利用HRP-链霉亲和素来检测,最后采用化学光或者HiLyte™Fluor 555-链霉亲和素来检测信号。
 

一般分类
根据应用分类:
    1.蛋白检测芯片---- 将具有高度亲和特异性的探针分子(如单克隆抗体)固定在基片上,用于识别复杂生物样品中的目标蛋白/多肽。根据检测方法,不同蛋白质检测芯片又可进一步分为正相蛋白质检测芯片和反相蛋白质检测芯片。 

正相蛋白质检测芯片首先用不同的荧光标记物对样品中的拟研究的蛋白质进行标记, 再将这些样品在抗体微阵列上进行温育, 然后用生物芯片扫描仪检测各个阵列分子点上荧光信号。

反相蛋白质检测芯片是用破碎的微量组织或者细胞样品点样制成的芯片, 代表在某种状态下整个细胞的蛋白质,然后用特定抗体进行检测。

2.蛋白功能芯片----天然蛋白点加在基片上,了解体系中哪种蛋白能与已知的某种蛋白结合,用于天然蛋白活性及分子亲和性研究。


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