材料与方法
1、来源:本院住院及门诊62例病人,其中男35例,女27例,抽取6ml静脉血,分别制备血清标本、肝素抗凝标本、EDTA-K2抗凝标本。
2、仪器与试剂:BIO-TEK Elx800型酶标仪,BIO-TDK Elx50洗板机。HBsAg试剂为珠海丽珠集团丽珠试剂厂提供,批号为20020701。
3、方法:不同类型标本均在抽血当天采用同一批试剂和同一块酶标板同时检测,操作时严格按照说明书进行。
4、结果判定:以样品吸光度/临界值(S/CO<1.0为阴性,S/CO>1.0为阳性。
结果
62例病人不同标本类型HBsAg测定结果见表1。用不同类型标本测定HBsAg结果均为阳性的12例病人,其检测结果与临床诊断符合率为100%;而在50例经临床诊断没有感染乙型肝炎的病人用不同标本类型检测HBsAg时,血清标本检测结果均为阴性,肝素抗凝标本和EDTA-K2抗凝标本检测结果的假阳性率分别为6%和4%
不同标本类型测定结果(表1)
标本类型 检测结果 | 血清 | 肝素抗凝 | EDTA-K2抗凝 |
HBsAg阳性 | 12 | 15 | 14 |
HBsAg阴性 | 50 | 47 | 48 |
讨论
目前,很多行业就业体检和入学体验均要求HBsAg检测结果必须为阴性,血液中心和血站对供血者健康检查标准中HBV的筛查要求(HBsAg)阴性[1],所以,HBsAg的检测结果是否准确具有非常重要的意义。血清是最常用的ELISA标本,血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其它成分等同于血清,除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本[2]。本文用两类抗凝的血浆标本检测HBsAg,均出现假阳性结果,出现这种现象的原因可能是由于聚苯乙烯塑料孔地纤维蛋白原的强吸附性,使一些酶结合物非特异性地吸附于固相载体而难于洗脱,当加入底物后,酶则催化底物显色而导致假阳性结果的出现。在临床检验工作中,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时离心分离血清,此时的血清中还有纤维蛋白原,在测定过程中可以形成纤维蛋白原块,易造成假阳性结果。因此在ELISA测定过程中,应该尽量避免使用抗凝的血浆标本,并且应该使用当标本充分凝固后而分离的血清,为临床提供正确可靠的结果。
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