血液分析仪与手工法计数儿童血小板误差原因分析

　　随着医学研究的发展及各种高科技技术在细胞生物学领域的应用,血液分析仪已经成为各级医疗机构常规实验诊断中不可缺少的仪器,具有快速、方便、所测项目多等诸多优点,但由于设计原理的问题,某些情况下易造成结果的假性增高或减低。在日常工作中发现,血细胞分析仪计数的儿童血小板(platelet,PLT)值高于正常参考范围的较成人偏多。我们随机分析了日常工作中使用MEK-6108型血液分析仪测得的600例血小板值,其中,成人(14岁以上)400例,儿童(14岁及以下)200例。并对儿童的标本同时用KX-21型血细胞分析仪和手工光学显微镜法计数血小板值。 
　　1 材料与方法 
　　1.1 仪器和试剂 
　　血液分析仪采用日本光电公司生产的MEK-6108型和日本东亚医用电子株式会社生产的KX-21型;稀释液、溶血剂等均使用各自配套试剂;光学显微镜计数血小板稀释液由实验室自配。 
　　1.2 标本的采集 
　　采用EDTA-2K抗凝的真空管,严格按规定要求(抗凝剂与血液比例严格控制、血流要顺畅)采集静脉血,标本要求无凝块和溶血。采集后在15 min～1 h测试完毕。 
　　1.3 方法 
　　400份成人标本只用MEK-6108型分析仪测定。200份儿童标本分别用两种仪器进行测定,且各测定两次取其平均值,同时用光学显微镜法计数其血小板值,每份标本计数两次取其平均值。各仪器操作严格按说明书要求,手工法采用改良许汝法,按《全国临床检验操作规程》要求进行。 
　　2 结果 
　　MEK-6108型血细胞分析仪所测的400例成人血小板值高于正常参考上限(300×109/L)者占6%,200例儿童血小板值高于正常参考上限(300×109/L)者占21%,儿童高于成人。 
　　MEK-6108和KX-21两种血细胞分析仪测得的儿童血小板值分别为(204.0±80.5)×109/L、(194.0±71.2)×109/L,两者经统计学处理,无显著性差异(P>0.05)。MEK-6108测得的值[(204.0±80.5)×109/L]与手工显微镜计数值[(190.0±65.3)×109/L]比较,无显著性差异(P>0.05)。 
　　将MEK-6108血液分析仪分析时出现异常报警(URI)的28例标本的血小板值[(486.0±98.7)×109/L]与显微镜计数的结果[(279.0±76.5)×109/L]进行比较,有显著性差异(P<0.05)。 
　　3 讨论 
　　不同的血液分析仪虽然有不同的生产厂家,且分析原理及试剂有所不同,但在分析时只要按其要求操作,所取标本合格、操作时间控制在一定范围内(15～60 min),所得的血小板结果无明显差异[1],笔者的结论也与之相符。 
　　血液分析仪所测得的血小板值高于正常参考上限的儿童多于成人,考虑可能有以下几方面原因:①某些疾病如肺炎、支气管炎、溶血性贫血、川崎病、上呼吸道感染、哮喘喘息发作期、肾病综合征等疾病可引起血小板增高,这可能与血小板活化参与其发病机制有关[2],而这几种疾病儿童的发病几率要大于成人。②在采集儿童静脉血液时由于儿童与工作人员难以很好地配合,采集到的标本很容易造成红、白细胞破坏形成碎片。由于血液分析仪对血小板的测定是与红细胞在同一个计数池中进行,其原理是在一定体积(2～24 fl)范围内的颗粒被计数为血小板[3]。当所测标本中有大量小红细胞或红、白细胞碎片,其体积进入血小板计数范围的被误认为血小板,使血小板计数假性增高[4]。③儿童多有厌食、偏食等不良饮食习惯,易发生营养不良性小细胞贫血,如缺铁性贫血。④有少数儿童在生理状况及操作因素的影响下其血小板本身就高于正常。 
　　因血球计数仪具有“浮动界标”纠正功能,并非只要当血液标本中存在小红细胞时就可以使计数的血小板值偏高于实际值,即使其体积<20 fl,也不至于影响血小板计数,只有当多量的小红细胞存在时,超出其功能纠正范围才出现错误结果[4],并且当出现此类错误时仪器一般会有URI报警提示,URI报警即提示小红细胞或红细胞碎片会对血小板计数有影响而造成计数误差,血小板直方图也会出现异常的表现,其曲线尾部并不是呈下降趋势与横坐标相交,而是呈上升走势。 
　　平均红细胞体积(MCV)是反映体内红细胞大小的一项指标,当血液内小红细胞数量增多时,MCV值就会低于正常参考值,而小红细胞数量增多到一定数量时又会影响血球计数仪对血小板计数的准确性,故而MCV值也可间接判断血球计数仪所计数血小板值的准确与否。和强等[2]报道MCV<70 fl时对血小板计数有影响,我们所分析的28例异常血小板直方图标本中有26例MCV<70 fl,与报道的基本一致。 
　　鉴于上述结果,笔者建议在使用血细胞分析仪计数儿童血小板值时,并不需要每一标本都进行手工显微镜计数,即使其结果高于正常参考范围。但只要当出现下列情况之一时,就必须用人工显微镜计数加以补充,以得到准确的结果:①血小板计数有警示信号(URI);②MCV<70 fl,且RBC直方图显示有<50 fl的小红细胞存在;③血小板直方图曲线呈齿状,表示有血小板聚集,此时血小板计数仪器法测得的结果偏低。