血脂检测试剂对总胆汁酸测定的交叉污染

全自动生化分析仪具有微量、快速、多项、准确、重复性好等特点。随着全自动生化分析仪的广泛应用，其测定过程中存在的交叉污染问题也受到关注。分析仪使用同一根试剂针吸取试剂，虽然分析仪有清洗系统，但试剂针很难通过一次短暂快速的清洗程序就清洗干净，一个项目对随后的一个项目甚至几个项目都会带来一定程度的试剂污染［1］，并且随着仪器使用时间的增加，试剂交叉污染程度会有所加剧。在工作中我们发现测定血脂后测定的总胆汁酸（tba），再复查时与原来测定值有差异，为研究血脂试剂是否都影响tba测定，我们实验观察了tc，tg，hdl，ldl等试剂，对tba是否存在交叉污染的情况进行分析，报告如下。

　　1  材料与方法

　　1.1  仪器与试剂  olympus au640全自动生化分析仪由日本olympus公司提供，tc，tg，hdl，ldl试剂由日本协和试剂提供，tba由日本第一化学试剂提供。

　　1.2  测定方法

　　1）首先对仪器进行保养，对比色杯、搅拌棒、试剂针进行浸泡清洗，以排除仪器本身原因对结果的影响。

　　2）从当天送检标本中提取血清，制备混合血清，取10份血清连续分别检测tba，此组数据设为tba。

　　3）再取50份血清，从1号到50号排序，1号检测tc，2，3，4，5号检测tba；6号检测tc，7，8，9，10号检测tba；11号检测tc，12，13，14，15号检测tba；16号检测tc，17，18，19，20号检测tba；以此类推，检测到50号。将2，6，12，16，22，26，32，36，42，46数据设为tc s1，将3，7，13，17，23，27，33，37，43，47数据设为tc s2，以此类推，得出数据tc s3，tc s4。

　　4）以同样的方法得出数据tg s1~s4，hdl s1~s4，ldl s1~s4。

　　1.3  统计学方法  采用spss软件，进行配对t检验。

　　2  结果

　　1）tba与测定血脂后tba测定值比较见表1。

　　表1  tba与测定血脂后tba测定值比较（略）

　　tba数据分别与s1，s2，s3，s4进行比较，结果见表2。在tc，hdl组，tba与s1，s2，s3比较差异有统计学意义（p＜0.05），与s4比较差异无统计学意义（p＞0.05）。在tg，ldl组，tba与s1比较差异有统计学意义（p＜0.05），与s2，s3，s4比较差异无统计学意义（p＞0.05）。
　　2）分别取tc，tg，hdl，ldl试剂2各10份，作为标本检测tba，结果见表3。

　　表2  tba分别与s1，s2，s3，s4配对t检验p值表（略）

　　表3  血脂试剂2中tba含量（略）

　　3  讨论

　　olympus au640全自动生化分析仪的试剂针要接触试剂盘中的各种试剂，每种不同项目间的吸取仅有一次冲洗过程，如果存在试剂交叉污染，将会对分析结果造成很大影响。由表2中可以看出血脂试剂对tba检测存在严重的交叉污染（p＜0.05）。tc，hdl试剂可以影响tba三个测试，tg，ldl试剂可以影响tba一个测试。试剂间的交叉污染原因是多方面的，主要有三个：第一，试剂成分中含有某种被污染的项目；第二，试剂中含有下一个测试所要测定底物或含有的某种试剂成分，与下一反应所测定的底物有作用，因而直接影响下一反应测定的结果；第三，该试剂所引导的反应给下一个项目反应进程带来了间接干扰［2］。从表3看出tc，hdl试剂2中对tba正干扰物质含量比较高，tg，ldl试剂2中对正干扰物质含量少一些，这与表1交叉污染结果是一致的。对于血脂试剂中对tba检测产生正干扰的物质的分析，从试剂成分看，血脂试剂2中均含有过氧化物酶，但未标明其含量，它是否增强了tba循环酶反应，还是有其他物质增强了反应，有待于进一步探讨。在检测中为避免血脂试剂对tba检测的影响，首先可以更改仪器参数，增加试剂针清洗次数；其次，可以调整试剂位，在血脂检测与tba测试之间，加做几个对tba无干扰的检测项目；还可以运用仪器本身的预防交叉污染程度、tba反应程序控制项目的反应次序，先测试tba，再测试血脂。但因为在实际工作中，标本编排次序和项目组合的随机性比较大，有时很难避开交叉污染，所以在编排标本检测顺序时，一定要考虑到血脂项目对tba的影响。

　　由于试剂成分的复杂多样性，实时仪器状况的独特性，可能发生的试剂间交叉污染的情况不尽相同，要想得到正确可靠的结果，不但要熟练掌握仪器操作，对仪器要精心维护和保养，也要了解各反应的原理，试剂组成，才能在实际工作中发现和避免试剂间的交叉污染。