评估UPLC／UV分析中的交叉污染

一、目的

为证实ACQUITY UPLC® I-Class系统对于多种样品(包括极高浓度的样品)均具有低交叉污染性能。

二、背景

当需要在同一次色谱分离中同时定量高浓度及低浓度的组分时所面临的最大的挑战是需解决样品残留问题。通常，为观察低含量的与主要分析物相关的杂质，必须注射高浓度的样品。为对分析物中的杂质进行精确分析，必须解决好分析物的样品残留问题，以使得不会因为低估存在于样品中的杂质的量，从而影响杂质计算值。在进行杂质分析时，样品浓度需达很高，且解决途径可能颇具挑战性。应注意稀释液、流动相、以及清洗溶剂的组分，以使样品残留量较低。系统设计在解决样品残留问题上也具有重要作用。通常，样品导入分析系统的方式越简单，则越容易解决样品残留问题，特别是当采用注射方法导入多种疏水性及极性差异较大的化合物时。

ACQUITY UPLC I-Class系统可以轻松解决颇具挑战性的某些相关化合物分析时的交叉污染问题。

三、解决方案

ACQUITY UPLC I-Class系统在设计上可实现低交叉污染，因而在用于分析多种相关化合物时具有极佳性能。Sample Manager的流通针式进样(FTN)设计可带来优化的高精度注射，并获得极佳的样品回收率。在等度运行期间使用梯度溶液清洗针头的内部，且在色谱运行期间清洗针头外部。

这样就很好地解决了样品残留问题，并且不会使总注射循环时间增加。为证实使用ACQUITY UPLC I-Class系统可很容易解决样品残留问题，选择性质差异较大的三种不同化合物。氯已定较粘稠，且通常非常难以完全自进样器去除。邻苯二甲酸二辛酯是疏水性极强的一种化合物，且需要高浓度的乙腈来使它从色谱柱上洗脱。咖啡因是亲水性物质，且通常不难以从进样器上去除，因而使其成为极佳的探针化合物，用以确定没有样品仍残留于该系统中。按UV响应为1.5 AU ± 0.1 AU的浓度注射各化合物，并测定在随后的空白注射中的样品残留量。如图1所示，对所有这些化合物，均未检测到可测得的样品残留量。为确定每种化合物的样品残留量，制备高浓度的样品(20x至40x浓缩)，并注射至ACQUITY UPLC I-Class FTN。测定每种化合物在首次空白注射中的样品残留量，得知这三种性质差异较大的分析物的样品残留量均少于0.001%。

四、小结

解决多种分析物的样品残留问题的能力是一个分析系统的重要性能。不论分析物的性质为何，ACQUITY UPLC I-Class系统的设计均可产生极低的交叉污染。Sample Manager的FTN注射平台的设计简单、灵活，因而可简单直观地对方法进行优化；因而可满足挑战较大的应用的要求，例如分析低浓度相关化合物。