发布时间:2018-06-25 16:29 原文链接: 试论转基因食品检测技术研究进展

  【摘 要】随着科学技术的迅猛发展,转基因食品大量出现,并且大量涌入市场。转基因食品到底对人们的健康有没有影响,至今还没有一个定论,因此,对转基因食品的检测受到了世界各国卫生组织机构的广泛关注。 
   随着现代科技的快速发展,以基因工程为代表的现代生物技术也取得了令人注目的成绩,特别是与人们生活密切相关的转基因食品,更是得到受到世界范围的广泛关注。自1996年至2005年,全球范围内转基因作物的种植面积在10年内,均以2位数速度,逐年递增。转基因技术的快速发展,一方面推动了生产力的快速发展;另一方面就转基因食品的安全问题,也一直存在着争议。转基因技术是否会对人体产生不良反应,以及它对生态环境是否会产生负面影响,科学界一直都争论不休。 
   一、外源蛋白质检测法 
   (1)蛋白质印迹法。这种检测法主要是依据抗体抗原的差异性与特异性,并且与检测多样化复杂样品中某种蛋白的方法相结合的一种检测方法。蛋白质印迹法是将靶蛋白特异性的非标记性抗体与靶蛋白中的抗原决定簇结合,然后再将蛋白质125I-蛋白A的免疫球蛋白抗体检测已结合上去的抗体。但是蛋白质印迹法并不适用于定量分析,因为考虑到成本问题,以及操作难度问题,也不适用于高通量筛选检测。(2)ELISA。ELISA检测是把抗体与抗原的反应特异性与酶对底物的高效催化作用有机的结合在一起,依据酶作用于底物之后所产生的显色反应来对转基因成分进行鉴别。这种检测方法具有方便、快捷、成本低的特点,存在的问题有:一是所导入的蛋白质并不是在植物的所有组织中均有表达;二是复杂基质对检测结果构成干扰;三是转基因食品在加工的过程中,部分蛋白质可能会发生降解反应,所以ELISA检测,仅适用于没有加工过的原材料。(3)免疫试纸条法。与蛋白质印迹法的主要区别是,免疫试纸条法是以硝化纤维来代替聚苯乙烯反应板为固相载体来进行的。检测结果在较短的时间内就能够得出,通常只需要5~10分钟,主要问题是检测的灵敏度不高,且一种免疫试纸条仅能为一种目的蛋白质提高检测,不能对食品具体的转基因品系加以区分。 
   二、核酸水平检验法 
   (1)核酸印记法。具体操作是将被检测样品的DNA固定在尼龙膜上,再用带有标记的核酸探针进行杂交,最后通过对标记探针的信号进行检验来确定样品中是否含有转基因DNA片段,这种检验方法的灵敏度是比较低的。(2)PCR检测法。这一检测方法主要是对目标序列进行扩增,再采取特殊方法对扩增产物进行检验。常见的PCR检测法有定性PCR、复合定性PCR、PCR-ELISA、竞争定量PCR。一是定性PCR。这种检测方法主要是对特异的DNA片段实施PCR扩增,然后将得到的扩增产物用琼脂糖凝胶电泳进行分离,再运用凝胶成像系统对分离状况进行观测,定性PCR的灵敏度非常高。二是复合定性PCR。把两对及其以上的引物放入PCR检测系统之中进行扩增。三是PCR-ELISA。将带有地高辛、生物素标记的引物放入PCR反应系统之中,对目标DNA的序列加以扩增,并且把PCR产生物与固相板上特异性探针相结合,同时放入抗地高辛,使底物产生变色反应,利用酶标仪测出相应的吸光值,再加入标样,描绘出标准曲线,最后利用这一曲线进行半定量分析。四是竞争定量PCR。浓度未知的待测DNA与已知浓度的内标DNA在同一个反应管内进行PCR扩增,并将产物进行琼脂糖凝胶电泳分离,再对电泳所产生的分离产物中的待测DNA与内标DNA的产物条带密度进行相关的线性回归分析,从而得出两种DNA的浓度等值点,以此对待测的DNA浓度进行定量分析。 
   三、其他检测方法 
   随着国内外对食品安全问题的持续关注,转基因食品的检测技术在持续不断的更新与发展,检测的水平也不断提高。这里面的近红外波谱技术原本是对谷物进行温度、脂肪含量、淀粉含量以及蛋白质含量进行分析的一种常规办法,而近几年来,这一技术主要应用于对转基因作物的检测领域,它的优势在于检测过程中,不需要对被检测物进行处理,操作简便快捷,且能够实现自动化处理,主要问题是不能够对食品的混合物进行检测。食品企业更是为了使产品走出国门,打入国际市场,站在全球战略的层面上进行考虑,必须加大检测转基因食品的投入与研究。除了要在检测技术上不断更新,不断应用之外,还必须逐步健全我国的转基因食品安全监督运行机制,完善相关的法律制度,才能保证转基因食品检测向着高灵敏度、高品质、低成本的方向发展,进入一个良性环境的状态。 

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