5.2.3 辣椒粉
称取辣椒粉3g（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入8mL乙腈（3.1.1）提取，涡旋振荡1min后，6000r/min离心5min。转移上清液于10mL离心管中，吹干后加入2mL氢氧化钠溶液（3.1.6），涡旋混匀30s后置于80℃水浴皂化5min。再加入2mL正己烷（3.1.3），涡旋萃取30s后，6000r/min离心5min，转移上清液于新的10mL离心管中，加入无水硫酸镁（3.1.2）0.5g，涡旋振荡30s后，4000r/min离心5min，转移上清液于10mL离心管中吹干。精密加入400μL复溶液（3.1.8），涡旋混合1min，作为待测液，立即测定。
1.1 测定步骤
5.3.1 试纸条与金标微孔测定步骤
吸取200μL待测液于金标微孔（3.4.2.1）中，抽吸5～10次使混合均匀，室温温育3～5min，将试纸条（3.4.2.2）吸水海绵端垂直向下插入金标微孔中，温育5～8min，从微孔中取出试纸条，进行结果判定。
5.3.2 检测卡与金标微孔测定步骤
吸取200μL待测液于金标微孔（3.4.2.1）中，抽吸5～10次使混合均匀，室温温育3～5min，将金标微孔中全部溶液滴加到检测卡（3.4.2.2）上的加样孔中，温育5～8min，进行结果判定。
1.2 质控试验
每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。
1.2.1 空白试验
称取空白试样，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。
1.2.2 加标质控试验
准确称取空白试样（精确至0.01g）置于具塞离心管中，加入一定体积的苏丹红I标准中间液（3.3.2），使苏丹红I添加浓度为10μg/kg，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。
2 结果判定
通过对比控制线（C线）和检测线（T线）的颜色深浅进行结果判定。目视判定示意图见图1。
2.1 无效
控制线（C线）不显色，表明不正确操作或试纸条/检测卡无效。
2.2 阴性
检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或者检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当，表明样品中苏丹红I低于方法检测限，判定为阴性。
2.3 阳性
检测线（T线）不显色或检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色浅，表明样品中苏丹红I的含量高于方法检测限，判定为阳性。
2.4 质控试验要求
空白试验测定结果应为阴性，加标质控试验测定结果应为阳性。
3 结论
当检测结果为阳性时，应对结果进行确证。
4 性能指标
4.1 检测限：辣椒酱、辣椒油、辣椒粉的检测限为10μg/kg。
4.2 灵敏度：灵敏度应≥99%
4.3 特异性：特异性应≥85%。
4.4 假阴性率：假阴性率应≤1%。
4.5 假阳性率：假阳性率应≤15%。
注：性能指标计算方法见附录A。
1 其他
本方法所述试剂、试剂盒信息及操作步骤是为给方法使用者提供方便，在使用本方法时不做限定。方法使用者在使用替代试剂、试剂盒或操作步骤前，须对其进行考察，应满足本方法规定的各项性能指标。
本方法参比标准为GB/T 19681-2005《食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法》。