近红外荧光检测Westernblot介绍

在介绍近红外荧光凝胶成像凝胶成像检测方法之前，我们来回顾下化学发光的历史：WB是目前蛋白检测的主要方法之一，1981年由尼尔·伯奈特（Neal Burnette）所著的《分析生物化学》中首次被提出，一直延续至今，仍有很多忠实的粉丝。 

化学发光检测的优点：

灵敏度高，其灵敏度高达fg级别。

从零到一，化学发光的优点深入人心，经历多年考验仍占据一定地位。

化学发光检测的缺点：

随着科研水平的提高，简单的化学发光已经不能满足现在高水平的科研要求。例如：目的和内参要在同一张印迹膜上，信号和蛋白浓度要有很好的线性关系，使用总蛋白归一化等方法，这样传统的化学发光就很难满足要求。

化学发光的信号是动态的，信号会随着时间而发生变化。

化学发光的信号不与目标蛋白的浓度呈线性比例关系。

由于期刊杂志要求的升级，荧光凝胶成像WB隆重登上舞台，特别是近红外荧光凝胶成像检测，成为荧光凝胶成像WB精准定量的金标准：

近红外WB的优点：

精准定量——荧光凝胶成像标记的信号是静态的，信号不会随着时间而发生变化。信号与目标蛋白浓度呈线性比例关系。

信号持久——印迹膜晾干避光保存，信号可持续数月，化学发光仅几小时

可进行多重检测——无需剪膜、跑平行胶和剥离膜，对于共迁移条带如磷酸化和非磷酸化检测优势更明显

节约成本——二抗可重复使用，稀释比例高，无需化学发光检测的胶片，显影液，定影液和显色底物

要想完成近红外荧光凝胶成像多重检测，需要带有近红外光源的多功能分子成像系统。

那市面上成像产品那么多，我们究竟该怎么进行选择？

最新的多功能分子成像系统——采用近红外激光光源，激光光源更容易达到染料的吸收峰、窄光谱激光减少光泄漏的产生、在更短的时间内产生更高的信噪比，背景更低。

多功能分子成像系统除了能完成双激光近红外检测，还可完成RGB三色荧光凝胶成像检测，高灵敏化学发光检测，彩色图片成像，普通凝胶检测、植物组织和动物组织成像等。