透射及扫描电镜的操作方法

　一、实验目的：
1、了解透射电镜、扫描电镜各部件的名称、结构及性能;
2、了解透射及扫描电镜的基本操作程序;
3、了解电镜样品制备的配套设备。
二、实验仪器及用品：
透射电镜;扫描电镜;小白鼠肝脏超薄切片;酵母菌或乳酸杆菌的负染样品;喷好金膜的叶片及花粉样品
三、方法步骤：
(一)透射电镜操作规程：
1、本仪器的操作者必须熟悉仪器的全部操作规程，通过操作考试后才能正式上机操作。
2、操作程序
1)开机准备
(1) 合上总电源闸刀，开启电子交流稳压器，电压指示应为220V。开启循环水，温度指示应为15-20℃。
(2) 开启主机真空开关。
(3) 约20分钟后，待高真空指示灯及照相室指示灯亮。
2)工作程序
(1)开启主机电源开关，待荧光屏显示操作数据后再进行下一步。
(2)逐级加高压致所需电压，每加一级高压，必须等高压表中指示针停止摆动才能加下一级。如指示针移出量程，必须从zui低移级加起。
(4) 根据说明书要求进行合轴操作，使仪器处于zui佳操作状态。
(4)根据说明书的操作要求进行观察、换样和拍照。
(5)作好实验记录及仪器使用记录。
3)关机程序
(1)关灯丝电流。
(2)关高压。
(3)关主机电源开关。
(4)关真空开关。
(5) 20分钟后，关循环水和电子交流稳压器开关。
(6) 关闭总电源。
(二)扫描电镜操作规程：
1、本仪器的操作者必须熟悉仪器的全部操作规程，通过操作考试后才能正式上机操作。
2、操作程序
1)开机准备
(1)合上总电源闸刀，开启电子交流稳压器，电压指示应为220V。开启冷却循环水装置电源开关。
(2)开启试样室真空开关(VACUUM POWER)，开启试样室准备状态开头(STAND BY)。
(3)开启控制柜电源开关(POWER).
(4)约20分钟后，往试样室液氮冷井中加入液氮。
2)工作程序
(1)开启试样室进气阀控制开关(CHAMB VENT)，将试样放入试样室后将试样室进气阀控制开关(CHAMB VENT)关闭抽真空。
(2)开启镜筒真空隔阀。
(3)加高压(ACCELERATION POTENTIAL)至25KV.
(4)加灯丝电流(FILAMENT)至7.5-8.
(5)调节显示器对比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)至适当位置.
(6)将图象选区开关拨至全屏(FULL).
(7)调节聚焦旋钮(MEDIUM)和(FINE)至图象清晰。
(8)选择适当的扫描速率(SCAN RATE)观察图象。
(9)根据说明书的操作要求进行观察和拍照。
(10)作好实验记录及仪器使用记录。
3)关机程序
(1)关灯丝电流(FILAMENT)。
(2)关高压(ACCELERATION POTENTIAL)。
(3)反时针调节显示器对比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)到底.
(4)关闭镜筒真空隔阀。
(5)关主机电源开关。
(6)关真空开关。
(7)20分钟后，关循环水和电子交流稳压器开关。
(8)关闭总电源。
四、观察结果：
1、小白鼠肝脏超薄切片：一般可见细胞膜、核膜、内质网、线粒体、肌纤维等结构。
2、酵母菌或乳酸杆菌的负染样品：由于重金属盐在样品周围的堆积而使样品显示负的反差，从而衬托出样品的形态和大小。酵母菌近球型，有时可见出芽生殖;乳酸杆菌为杆状。
3、叶片在扫描电镜下一般可见上表皮有各种纹饰，下表皮可见气孔器形态
4、花粉在扫描电镜下一般可见表面的萌发沟和纹饰。
观察过程中寻找典型部位进行拍照。