食品中着色剂的测定（一）

   一、目的与要求：

　　1、明确测定各类色素的原理与方法。

　　2、通过此实验掌握纸层析定性法与提纯色素的定量法。

　　二、原理：

　　聚酰胺是具有二极性的化合物，水溶性酸性染料在酸性条件下被聚酰胺吸附，而在碱性条件下解吸附，再用纸色谱法或薄层色谱法进行分离后与标准比较定性、定量。

　　三、试剂：

　　1、聚酰胺粉(尼龙6)

　　2、硫酸1：1 0

　　3、甲醇—甲酸溶液：6：4

　　4、甲醇

　　5、20%柠檬酸溶液

　　6、10%钨酸钠溶液

　　7、石油醚：沸程60-90℃

　　8、海砂：先用l：10盐酸煮沸15min，用水洗中性，再用5%氢氧化钠溶液煮沸15min，再于105℃干燥，贮于具玻璃塞的瓶中，备用。

　　9、乙醇-氨溶液：取1毫升氨水，加70%乙醇至100毫升。

　　10、50% 乙醇溶液

　　11、硅胶G。

　　12、PH6的水：用20%柠檬酸调节至PH 6。

　　13、盐酸: 1：10

　　14、5%氢氧钠溶液

　　15、碎瓷片：处理方法同海砂

　　16、展开剂

　　a、正丁醇-无水乙醇-1%氨水(6：2：3)：供纸色谱用。

　　b、正丁醇-吡啶-1%氨水(6：3：4)：供纸色谱用。

　　c、甲乙酮-丙酮-水(7：3：3)：供纸色谱用。

　　d、甲醇-乙二胺-氨水(10：3：2)：供薄层色谱用。

　　e、甲醇-氨水-乙醇(5：1：10)：供薄层色谱用。

　　f、2.5%柠檬酸钠-氨水-乙醇(8：1：2)供薄层色谱用。

　　17、色素标准溶液{以下商品作为标准以100%计。

　　胭脂红：纯度60%;苋菜红：纯度60%;柠檬黄：纯度60%;靛蓝：纯度40%;日落黄：纯度60%，亮蓝;纯度60%。

　　精密称取上述色素各0.100克，用PH6的水溶解，移入100毫升容量瓶中并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1毫克商品色素。靛蓝溶液需在暗处保存。

　　18、色素标准使用液：用时吸取色素标准溶液各5.0毫升，分别置于50毫升容量瓶中，加PH6的水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于0.1毫克商品色素。

　　四、仪器：

　　1、分光光度计

　　2、微量注射器或色素吸管

　　3、展开槽，25 X 6 x 4cm

　　4、层析缸

　　5、滤纸、中速滤纸，纸色谱用

　　6、薄层板：5 X 20em

　　7、电吹风机

　　8、水泵