高效液相色谱常见故障的断定及解决

 （一）保留时间变化

1.柱温变化 柱恒温，必要时需配置恒温箱；

2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱；

3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液；

4.柱污染 每天冲洗柱；

5.柱内条件变化 稳定进样条件，调节流动相；

6.柱快达到寿命 采用保护柱。

（二）保留时间缩短

1.流速增加 检查泵，重新设定流速；

2.样品超载 降低样品量；

3.键合相流失 流动相PH值保持在3～7.5检查柱的方向；

4.流动相组成变化 防止流动相蒸发或沉淀；

5.温度增加 柱恒温。

（三）保留时间延长

1.流速下降 管路泄漏，更换泵密封圈，排除泵内气泡；

2.硅胶柱上活性点变化 用流动相改性剂，如加三乙胺，或采用碱至钝化柱；

3.键合相流失 同前（二）3；

4.流动相组成变化 同前（二）4；

5.温度降低 同前（二）5。

（四）出现肩峰或分叉

1.样品体积过大 用流动相配样，总的样品体积小于第一峰的15%；

2.样品溶剂过强 采用较弱的样品溶剂；

3.柱塌陷或形成短路通道 更换色谱柱，采用较弱腐蚀性条件；

4.柱内烧结不锈钢失效 更换烧结不锈钢，加在线过滤器，过滤样品；

5.进样器损坏 更换进样器转子。