高效液相色谱柱分离效果的好坏

 高效液相色谱柱具有高表面覆盖率和完全封尾的特点，提高了我们色谱柱的稳定性，适合pH值1.5～10.0很宽范围内的色谱分析。我们对的基质上进行的键合反应进行了特别的优化。独特的双封尾技术使我们的色谱柱对中性、极性、酸性和碱性以及螯合化合物的分析具有zui优的分离效率。

    高效液相色谱柱采用高纯硅胶为基质,键合Phenyl(苯基)后可提供独特的选择性,对杂环化合物和芳香类化合物有独特的选择性和好的分离效果。

    高效液相色谱柱分离效果的好坏：

    一、硅胶基质填料

    1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其它具有极性官能团，如胺基和氰基的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其它极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份zui先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正己烷，氯仿，二氯甲烷等。

    2、反向色谱 反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分zui先被冲洗出，而极性较弱的组分在色谱柱上有更强的保留。常用的反向填料有C18、C8、C4等。

    二、聚合物填料

    聚合物填料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂等，其重要优点是在PH值为1-14均可使用。相对于硅胶基质的C18填料，这类填料具有更强的疏水性；大孔的聚合物对蛋白质等样品的分离非常有效。现有的聚合特填料的缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效较低。

    三、其它无机填料

    其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化，由于其特殊的性质，一般仅限于特殊的用途。如石墨化碳黑正逐渐成为反向色谱柱填料。这种填料的分离不同于硅胶基质烷基键合相，石墨化碳的表面即是保留的基础，不再需其它的表面改性。该柱填料一般比烷基键合相硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强。石墨化碳可用于分离某些几何异构体，由于在HPLC流动相中不会被溶解，这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可以用于HPLC。氧化铝微粒刚性强，可制成稳定的色谱柱柱床，其优点是可以在PH高达12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物的作用也很强，应用范围受到一定限制，所以未能广泛应用。新型色谱氧化锆基质填料也可用于HPLC。商品化的只有聚全物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱，应用PH1-14，温度可达100℃。由于氧化锆填料是zui近几年才开始研究，加之面临的实验难度，其重要用途与优势尚在进行之中