高效液相色谱法与经典液相色谱法的主要区别

一、类型不同

1、高效液相色谱法

1）吸附色谱法(Adsorption Chromatography)

2）分配色谱法(Partition Chromatography)

3）离子色谱法(Ion Chromatography)

4）分子排阻色谱法/凝胶色谱法(Size Exclusion Chromatography)

5）键合相色谱法（bonded-phase chromatography）

6）亲和色谱法(Affinity Chromatography)

2、经典液相色谱法

1）吸附色谱法

吸附色谱法的固定相为吸附剂，色谱的分离过程是在吸附剂表面进行的，不进入固定相的内部。

2）分配色谱法

这种色谱的流动相和固定相都是液体，样品分子在两个液相之间很快达到平衡分配，利用各组分在两相中分配系数的差异进行分离，类似于萃取过程。

3）离子交换色谱

离子交换色谱通常用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固定相离子进行可逆交换，由于各组分离子的交换能力不同，从而达到色谱的分离。

二、特点不同

1、高效液相色谱法

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

2、经典液相色谱法

以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。

三、应用不同

1、高效液相色谱法

由于高效液相色谱法具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域，并已成为解决生化分析问题最有前途的方法。

2、经典液相色谱法

液相色谱是常温操作，不受样品挥发度和热稳定性的限制，它非常适合相对分子量较大，难汽化，不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物和高聚物的分离分析，大约占有机物的70%~80%。