高效稳定！谱聚医疗LCMS／MS助力毒物临床筛查

　　项目背景

　　作为农业大国，我国对农药的使用历史悠久、种类繁多。然而农药的使用给农业带来产量保证的同时，也由于把控不严，很容易产生滥用情况。污染环境是其一，更深层次的是容易使人误食农药残留超标的农产品，轻则对人身健康造成危害，重则危及生命。

　　常见的农药主要包括有机磷类、拟除虫菊酯类、氨基甲酸酯类、除草剂及其它水溶性农药。大量研究表明，农药暴露与某些慢性疾病的发生率升高之间存在着联系，包括癌症、帕金森病、阿尔茨海默病、多发性硬化症、糖尿病、心血管疾病、慢性肾脏病及不育症等。此外，由于意外、自杀或故意犯罪而导致的急性农药中毒案例也时见报道。

　　由于毒物分析所面对的测定对象多为未知物，并且含量较低，同时检测样品多为血液、尿液、组织及呕吐物等复杂样品，因此研究和寻找适合多种化合物同时分析，具有一定通用性的快速分析筛选方法就成为急救医学的重要研究内容之一。

　　随着质谱技术的发展，色谱-质谱联用技术（LC-MS/MS）由于具有灵敏度高、检测范围广的特点，已成为较为成熟且被广泛运用。

　　故根据临床市场检测需求，基于液质平台开发针对血液中常见数十种农药精准筛查的方法， 一方面可做到对农药中毒的定性诊断：对于一些患者诊断不明确，需要与中毒鉴别诊断时，可以第一时间实现农药中毒的定性诊断，为临床医生早期采取积极治疗提供了客观依据；

　　另一方面可做到对于农药中毒的定量检测：对于诊断明确的中毒患者，体内毒物的定量检测，不仅可以评估患者的预后，还可以指导制定最佳的毒物清除方案，如指导血液净化清除相关毒物，既能防止对患者的过度医疗，浪费患者的物力财力、又能避免治疗不足，增加患者的死亡风险。

　　临床报道案例

　　患者信息：2019 年 9 月，甘肃省某男子在家中用餐后中毒死亡，经调查其妻子在该名男子所喝菜汤中加入了农药，农药来自于一标有 “氯氰菊酯”字样的塑料瓶，瓶内农药已被倒光。送检检材包括塑料瓶的甲醇提取液约 5 mL，死者血液样品约 3 mL。

　　临床检测：取 10 μL 塑料瓶提取液用甲醇逐级稀释 1 000 倍进行分析，检出高浓度的敌敌畏、毒死蜱和氯氰菊酯。

　　结果：取死者血液样品 200 μL 按照本研究所建立的方法进行分析，检出敌敌畏 189. 04 ng /mL，tＲ = 4. 93 min，定量离子对 220. 9 /109. 0( m/z) ； 毒死蜱 171. 32 ng /mL，tＲ =11. 79 min，定量离子对 349. 9 /197. 9( m/z) ； 氯氰菊酯 106. 50 ng /mL，tＲ =12. 73 min，定量离子对 433. 1 /191. 0( m/z) ，其色谱图见下图。

三种农药的色谱图

　　结论：实验结果表明该LC-MS/MS方法可应用于实际案例的检测，为法医毒理学生物基质中多农药的检验鉴定提供了高效可靠的途径。

　　项目内容

　　本研究结合实际中毒案例，选取了常见的数十种农药( 详见第三部分药物种类) 。结合高效液相色谱 -串联质谱(LC-MS /MS) 技术进行分析研究，通过优化前处理和分析条件，建立了同时测定血液中农药的方法。该方法简单高效，实现了一针进样同时对数十种农药进行分析的目的，对临床和法医毒物检验工作具有重要意义。

　　仪器设备

图片型号：PreMed 5200 （浙械注淮20222220115）

　　标准品、试剂

　　数十种农药标准品（20mg/L）、甲醇、甲酸铵、甲酸为色谱级，柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠、氯化钠、乙酸钠、无水硫酸镁为分析纯，乙腈为色谱纯。

　　质谱条件

　　监测模式为多反应监测(MRM)，部分化合物监测离子对、碰撞电压(CE)等参数见下表。

　　样品前处理

　　详见杭州谱聚医疗的毒物筛选检测试剂说明书。

　　结果

　　典型图谱。数十种农药的MRM叠加色谱图如下图所示：

　　重复性。经过验证，测得农药及其代谢物的峰面积重复性RSD均小于10%，满足方法学验证要求。

　　结论

　　本项目建立了液相色谱-串联质谱同时测定血液中数十种农药的方法。该方法简便快速、灵敏度高、稳定性好，满足了实际工作中一针进样同时对数十种农药进行定性定量分析的需求，为临床多农药的检验鉴定提供了高效可靠的途径。

　　药物种类

　　解决方案

　　检测方法：液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。

　　专业高效的检测流程：血样采集——>高通量的样本前处理方案——>上机检测——>自动审核数据及生成报告。

　　仪器：超高效液相色谱仪（具体配有二元超高压输液泵、超高压自动进样器、柱温箱）、PreMed 5200 液相色谱串联质谱系统。

　　质谱条件：使用APCI源，监测模式为多反应监测(MRM)。为提高检测灵敏度，可根据保留时间分段监测各化合物。

　　关于谱聚

　　聚光科技生命科学板块旗下谱聚医疗是一家医疗临床质谱产品服务平台，聚焦于质谱硬件及配套个性化定制、临床医学样本检测体外诊断试剂盒产品及应用技术、临床科研合作等领域，将竭诚为客户提供集成化、自动化、标准化和流程化的临床质谱解决方案，使客户享受一站式的定制化服务。并致力于提供普惠大众的临床质谱技术，推动中国临床质谱深入发展和突破卡脖子关键难题。

　　参考文献：杜秋瑶，张云峰，王继芬，超高效液相色谱 -串联质谱法同时测定血液中 115 种农药[J] 2020,39(4) : 485 ～ 491.