高渗漏型AspAT基因工程菌诱导表达的研究

摘　要　利用异丙基- β- d - 硫代半乳糖苷( IPTG) 诱导有高渗漏表达现象的天冬氨酸转氨酶(AspAT) 工程菌,研究是否可以在这一类基因工程菌中提高酶的产量及活性。在观察IPTG诱导后菌体生长的同时,观察不同的时间及条件下酶活性的变化,发现插入含有天冬氨酸转氨酶基因(AspC ,112kb) 的pUC18 质粒的BL21 (DE3) 在较高渗漏表达的情况下,用IPTG37 ℃诱导培养8 h后酶表达开始升高,12 h后趋于稳定表达;同时发现用011mmol/ L IPTG诱导后酶的活性提高最多,比未诱导前提高一倍以上。研究认为如果培养条件恰当这类菌应该可以用IPTG诱导高效表达目的酶蛋白。