高锰酸钾法测定还原糖的原理

　　国标规定的还原糖的检测有四种方法，第一法和第二法适用于食品中还原糖的测定。

　　第三法适用于小麦粉中还原糖含量的测定。

　　第四法适用于甜菜块根中还原糖的测定。

　　一.实验原理

　　试样经除去蛋白质之后，其中还原糖把铜离子还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，经高锰酸钾溶液滴定氧化作用之后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量，计算亚铜含量，再查表得还原糖量。

　　二，试剂

　　2.1使用试剂

　　2.2试剂配制

　　a.盐酸溶液（3mol/L）：量取盐酸30ml，加水稀释至120ml。

　　b.碱性酒石酸通甲液：称取硫酸铜34.639g，加适量水溶解，加硫酸0.5ml，再加水稀释至500ml，用精制石棉过滤。

　　c.碱性酒石酸铜乙液：称取酒石酸钾钠173g与氢氧化钠50g，加硫酸0.5ml，在加水稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。

　　d.氢氧化钠溶液（40g/L）：称取氢氧化钠4g，加水溶解稀释至100ml。

　　e.硫酸铁溶液（50g/L）：称取硫酸铁50g，加水200ml溶解后，慢慢加入硫酸100ml，冷却后加水稀释至1000ml。

　　f.精制石棉：取石棉先用盐酸浸泡2d-3d，用水洗净再加氢氧化钠溶液浸泡2d-3d，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时，用水洗净。再以盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。然后加水振摇，使成细微的浆状软纤维，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可作为填充古氏坩埚用。

　　2.3标准品

　　标准溶液按照GB/T 601 配制与标定。

　　三.仪器和设备

　　四.分析步骤

　　1.试样的处理

　　a.含淀粉的食品：称取粉碎或混匀后的试样10g-20g（精确至0.001g），置250ml容量品中，加水200.0ml，在45℃水浴中加热1h，并时时振摇。冷却后加水至刻度，混匀，静置。吸取200.0ml上清液置另一250ml容量瓶中，加碱性酒石酸铜甲液10ml及氢氧化钠溶液4ml，加水至刻度，混匀。静置30min，用干燥的滤纸过滤，弃去初滤液，取后续滤液备用。

　　b.酒精饮料：称取100g（精确至0.01g）混匀后的试样，置于蒸发皿中，用氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积的1/4后，移入250ml容量瓶中。加水50ml，混匀。加碱性酒石酸铜甲液10ml及氢氧化钠溶液4ml，加水至刻度，混匀。静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取后续滤液备用。

　　c.碳酸饮料：称取100g（精确至0.001g），混匀后的试样，试样置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入250ml容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗涤并入容量瓶，再加水至刻度，混匀后备用。

　　d.其他食品：称取粉碎后的固体试样2.5g-5g（精确至0.001g）或混匀的液体试样25g-50g（精确至0.001g），置于250ml容量瓶中，加水50ml，摇匀后加碱性酒石酸通甲液10ml及氢氧化钠溶液4ml，加水至刻度，混匀。静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，去后滤液备用。

　　2.试样溶液的配制

　　吸取处理后的试样溶液50.0ml，于500ml烧杯内，加入碱性酒石酸铜甲液25ml及碱性酒石酸铜乙液25ml，于烧杯上盖一表面皿，加热，控制在4min内沸腾，在精确煮沸2min，趁热用铺好静置石棉的古氏坩埚（或G4垂融坩埚）抽滤，并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止，将古氏坩埚（或G4垂融坩埚）放回原500ml烧杯中，加硫酸铁溶液25ml、水25ml，用玻璃棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以高锰酸钾标准溶液滴定至为微红色为终点。

　　同时吸取水50ml，加入与测定试样时相同量的碱性酒石酸铜甲液乙液、硫酸铁溶液及水，按统一方法做空白试验。

　　五.分析结果的表述

　　六.精密度

　　在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的10%。