鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）酶联免疫分析

发布时间：2019-03-02 20:10 原文链接：鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）酶联免疫分析

鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）酶联免疫分析（ELISA）

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用

目的：本试剂盒用于测定鸡血清，血浆及相关液体样本中可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）的含量。

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）水平。用纯化的鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR），再与HRP标记的可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）浓度。

试剂盒组成：

试剂盒组成	48孔配置	96孔配置	保存
说明书	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1个	1个
酶标包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
标准品：2700ng/L	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
标准品稀释液	1.5ml×1瓶	1.5ml×1瓶	2-8℃保存
酶标试剂	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
样品稀释液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
显色剂A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
显色剂B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
终止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
浓缩洗涤液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃保存

样本处理及要求：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。