麦胚凝集素的分离纯化及其在亲和层析中的应用

[摘要] 目的:将分离纯化麦胚凝集素(WGA) 的方法和固定化WGA 亲和层析柱的制备方法进行改良,从而得到能够有效结合细胞膜受体的亲和层析柱。方法:依次用去脂抽提、分级盐析、离子交换层析、甲壳素亲和层析的方法分离纯化WGA;将制备的WGA 与用溴化氰活化的琼脂糖4B(Sepharose 4B) 耦联固定。结果:得到的纯化倍数为15815 倍的WGA 单体相对分子质量为16 000 ,表观相对分子质量为32 000 ,血凝活力为813 mg·L - 1 。WGAOSepharose4B 可以与红细胞表面糖基特异性结合。结论:改良的WGA 分离纯化方法和固定化WGA亲和层析柱的制备方法简便、有效,可用于实验室中细胞膜受体的研究。