发布时间:2008-09-13 10:14 原文链接: 黄鳝碱性磷酸酶的分离纯化及其部分性质研究

摘要:经Tris2HCl 缓冲液(pH 816) 抽提,正丁醇处理,30 %—75 %硫酸铵分级沉淀分离,DEAE2Sepharose 离子交换柱层析,Sephacryl S2200 凝胶过滤纯化,从黄鳝内脏组织中分离纯化出电泳纯的碱性磷酸酶。该酶提纯倍数为564 倍,比活力达到3015 U/ mg。酶学性质和动力学性质研究表明,该酶催化磷酸苯二钠的水解反应,最适pH 值为1012 ,pH小于7 和大于12 均不稳定;最适温度为40 ℃,温度高于50 ℃不稳定;米氏常数Km 值为1117mmo1/ L。金属离子对该酶的催化活力有不同的影响,K+ 对该酶活力无影响,Mg2 + 对该酶有激活作用,Zn2 + 对该酶有抑制作用。
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