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动物实验中常用抗凝剂介绍

应用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子,阻止血液凝固,成为抗凝。阻止血液凝固的化学试剂称为抗凝剂。对抗凝剂的一般要求是用量少、溶解度大、不影响测定。生化检验常用的抗凝剂有以下几种: 1、肝素:肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖,其抗凝机制主要是对抗凝血活酶和凝血酶的形成和活性,阻止血小板聚集。肝素抗凝适用于红细胞脆性试验、血气分析、血细胞比容试验、血沉及普通生化测定;不适用于做血凝试验和白细胞计数。使用1.0g/L的肝素溶液0.5ml可抗凝5ml血液。肝素抗凝浓度为20~30U/ml全血。 2、草酸钾-氟化钠:草酸钾可与血中钙离子生成草酸钙沉淀,从而阻止血液凝固。草酸钾溶解度大,抗凝作用强。氟离子能结合钙而抗凝,但抗凝效果较弱。氟离子可抑制糖酵解中的烯醇化酶,防止糖酵解。若未加氟化钠,血标本中葡萄糖含量将以每小时6%的速度降解。而在氟化钠的存在下,血糖浓度在25℃可稳定24小时,4℃可稳定48小时。因......阅读全文

血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定-1

血液及组织样品的制备分析组织中某种物质的含量、探索物质代谢的过程和规律,经常使用动物的肝、肾、脑、粘膜和肌肉等组织,也选用全血、血浆、血清或者无蛋白血滤液等血液样品,有时也采用尿液、胃液等完成各种生化实验。掌握以上各种实验样品的正确处理和制备方法是保证生化实验顺利进行的关键。一、血液样品(一)采血测

动物实验中常用抗凝剂介绍

  动物实验中常用抗凝剂介绍    应用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子,阻止血液凝固,成为抗凝。阻止血液凝固的化学试剂称为抗凝剂。对抗凝剂的一般要求是用量少、溶解度大、不影响测定。生化检验常用的抗凝剂有以下几种:    1、肝素:肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖,其抗凝机制主要是对抗

生物化学实验的基本操作-2

二、一般操作技术1、混匀法:欲使一化学反应充分进行,必须使反应体系内各种物质迅速地相互接触,因此除特别规定外,一般都需要将反应物彻底混匀。混匀方式大致有以下几种,可随使用的器皿的液体容量而选用。(1)旋转混匀法:手持容器作离心旋转,适用以未盛满液体的试管或小口器皿,如三角瓶等。(2)弹指混匀法:左手

动物细胞基因组DNA的制备

实验概要本实验介绍了动物细胞基因组DNA的制备原理及操作流程。本方法一般可从5×107培养的非整倍体细胞(如HeLa细胞)中获得大约200μg DNA。DNA的长度可达到100~150kb。20ml正常血的DNA产量约为250μg。实验原理真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组 &

玫瑰花环试验

实验概要本实验介绍了玫瑰花环试验的原理、方法和注意事项等,玫瑰花环试验是目前鉴定和计算外周血液和各种淋巴样组织中T淋巴细胞的最常用方法之一。实验原理动物T淋巴细胞表面具有结合异种动物红细胞的受体,称为E受体,在体外一定条件下,能与绵羊等动物的红细胞结合,形成以T细胞为中心,红细胞环绕在周围,宛似一朵

玫瑰花环试验

实验概要本实验介绍了玫瑰花环试验的原理、方法和注意事项等,玫瑰花环试验是目前鉴定和计算外周血液和各种淋巴样组织中T淋巴细胞的最常用方法之一。实验原理动物T淋巴细胞表面具有结合异种动物红细胞的受体,称为E受体,在体外一定条件下,能与绵羊等动物的红细胞结合,形成以T细胞为中心,红细胞环绕在周围,宛似一朵

Southern blot对动物细胞基因组DNA中小卫星多态性的检测

实验概要本实验介绍了动物细胞基因组DNA中小卫星多态性Southern blot检测的原理和操作步骤。掌握核酸杂交检测技术(Southern blotting技术)、核酸探针的标记技术、小卫星DNA多态性检测分析技术(DNA 指纹图谱技术)和化学发光检测技术。实验原理Southern印迹杂交技术包括

灵敏度酶试剂快速测定农药残留量

  1 前言  有机磷和氨基甲酸酯类农药是果蔬种植中最常用的杀虫剂。此类农药的毒理机制为抑制人和动物体内胆碱酯酶的生理活性,使神经传导受阻,致使人和动物神经麻痹乃至死亡。  除了使用农药残留速测仪外采用酶抑制率法检测农药残留是目前我国控制农残超标的果蔬流入市场的最常用的快速检测方法。在这个技术中,酶

梳理维生素E功能研究进展

  维生素E(Vitamin E)是一种脂溶性维生素,其水解产物为生育酚,是最主要的抗氧化剂之一。它是机体许多器官、神经以及肌肉维持正常功能的必要营养物质,而且其也是一种抗凝剂,可以减少凝血。人体不能生成维生素E,只能从油脂、肉类以及其它食物中摄入,但是人们常常摄入维生素E的水平不足,尤其是在低脂饮

老年糖尿病患者人工种植牙的特点

  糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一组由于胰岛素分泌减少和/或作用受损而导致的以高血糖为特征的内分泌及全身代谢紊乱性疾病,2000年其全球患病率为2.8%,预计到2030年将上升至4.4%。临床上将糖尿病分为胰岛素依赖型(Ⅰ型)糖尿病和非胰岛素依赖型(Ⅱ型)糖尿病。Ⅰ型糖尿病是

原代细胞分离与培养,你都掌握了吗?

  对于大部分科研人员来说,研究中一般用到均是现成的细胞系/株,我们只需要:进行细胞传代和保种。然而,这些细胞系常常由于体外长期培养,而丢失原有生物学特性,对药物处理的反应差距越来越大。因此,原代细胞的地位日渐凸显,Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而,就小编亲生经历,原代细胞分离着实

神药不再?两大国际权威杂志发文阿司匹林“没益处”!

 神药不再?两大国际权威杂志发文,阿司匹林“没益处”!在近日召开的欧洲心脏病学会年会上,哈佛大学和牛津大学的研究团队分别报告了两项大型临床试验的结果:对于心血管疾病危险中等的中老年人以及糖尿病患者,用阿司匹林预防心血管疾病的发生,基本没有益处!其论文分别发表在了《柳叶刀》和《新英格兰医学杂

蛋白质与多肽激素的放射免疫分析-3

 (四)磁性分离法  1975年,Hersh报道了用磁化分离技术分离血清狄高辛放免测定的B、F后,受到了广泛的重视。近年来国内外许多学者对磁化颗粒的制备进行了系统地研究,应用于B与F的分离,并取得了引人注目的进展,使放免的B、F分离不再使用离心,缩短了放免操作时间,便于放免自动化测量。磁性分离的具体

西罗莫司在血管异常类疾病中显奇效

  药物的发现以及研究总是和人类与自身各种疾病作斗争的历程相伴相随。其中,有些药物在历史的长河中被逐渐取代,有的药物则随着人们的认知,不断带给人们新的惊喜。比如近年来不断被“解锁”新技能的阿司匹林,比如心血管疾病用药心得安(普萘洛尔)在婴幼儿血管瘤治疗领域已成为绝对主力。  今天要介绍的药物--西罗

脉管系统寄生虫的病原检查方法

脉管系统寄生虫的病原检查方法:由于脉管系统内寄生虫的寄生部位及离体途径的不同,决定了病原学检查方法的不同。弓形虫滋养体速殖子阶段也可寄生在血液的有核细胞内。本章主要介绍丝虫、血吸虫、疟原虫、利什曼原虫、锥虫及巴贝虫的病原学检查。有关免疫学及分子生物学检查方法见其它网页。一、血膜染色法血液检查是诊断疟

ELISA技术综述

  ELISA原理   ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性,对标本进行检测;由于结合与固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性,因此设计 其结合 机制後,配合酵素显色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同,ELI

膜蛋白的纯化实验

实验步骤一、膜的制备从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能高表达目的膜蛋白的组织或细胞系就很重要。最近,人们对于将细胞表面蛋白质作为鉴定不同

膜蛋白的纯化实验

实验步骤 一、膜的制备 从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。 大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能

2018中国质谱大会生命科学与医学集锦

  分析测试百科网讯 2018年11月24日-26日,2018年中国质谱学术大会在广州东方宾馆盛大召开。本次大会包括一个报告主论坛,21个主题分论坛,共300余场演讲报告。在“生命科学与医学”分论坛上,数十位业内专家学者带来精彩的演讲报告,吸引参会人员驻足聆听。分析测试百科网作为本次活动的合作媒体,

【综述】重组蛋白糖基化表征的进展与展望

  内容  1. 前言:生物制品糖基化表征的重要性  2. 糖蛋白表征用分析方法  2.1 糖基化特性  2.1.1 多糖的直接分析  2.1.2 糖谱分析  2.1.3 N-糖的异质性分析  2.1.4 单糖的分析  2.2 多糖分析用技术  2.2.1 糖分离技术  2.2.2 多糖检测技术