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DTT，二硫苏糖醇，分子式为C4H10O2S2，分子量为154.25，纯度>99%。......阅读全文
真核生物前体 mRNA ( pre-mRNA ) 的剪接分为两步，即先从前体切去内含子，然后将两个外显子连接在一起形成成熟的 mRNA。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理剪接反应的典型做法是使用核提取物，即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组
实验方法原理 剪接反应的典型做法是使用核提取物，即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分，最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体
随着MRI技术的发展，弥散张量成像（diffusion tensor imaging，DTI）在中枢神经系统疾病中得到广泛应用，不仅可以通过多个数据参数进行量化评估各疾病相关纤维束的损伤类型和预后；还可通过纤维束示踪技术（diffusion tensor tracking，DTT）在活体上以三维
1,关于使用三氯醋酸沉淀法后蛋白质难于重悬的问题Q:1,Hi !I have been trying to clean and concentrate proteins form eucariotic cell culture medium in order to analyse them in 2
实验方法原理 剪接反应的典型做法是使用核提取物，即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分，最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体聚合酶体外转录的方法来制备。实验材料 tRNAUTPRNA 聚合酶试剂、试剂盒 YPTris-HCl ETDASD
实验方法原理 剪接反应的典型做法是使用核提取物，即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分，最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体聚合酶体外转录的方法来制备。 实验材料 tRNAUTPRNA 聚合酶 试剂、试剂盒 YPT
7、转化BL21(DE3)pLysS菌株检测GST融合蛋白的表达(1)冰上融化BL21(DE3)pLysS感受态细胞(天根)(2)2 ml离心管中，加入25μl BL21+ 3μl质粒(300-500ng)，混匀(质粒≤感受态1/10)(3)冰上放置30mi
分子杂交技术 互补的核苷酸序列通过Walson-Crick 碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA 分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DN
Motor proteins of several kinesin family groups have now been crystallized: monomeric Kinesin-1 motor domains from human, rat andNeurospora (Kull
YWB per 10ml5mL 2M Sorbitol (if NZ arrested, add 40uL 1.5mg/mL0.336mL 1M K2HPO4 N2 to 4mL YWB)0.064mL 1M KH2PO44.6mL dH2OYWB, glycerol, PMSF5mL 2
DTT作用如下：1、DTT的作用之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体，特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验（如DNA在生物感应器中的固定）的效率；而在DNA溶液中加入DTT，反应一段时间后除去，就可以降低DNA的二聚化。2
I. Solutions & SuppliesII. Prepolymerization ClarificationIII. GTP PolymerizationIV. Taxol PolymerizationV. GMPCPP PolymerizationVI. Determining C
HYBRIDIZATION.Prehybridize blot at 65oC for ~3h in Church buffer containing 0.5mg/ml denature salmon sperm DNA (usually 14ml Church buffer plus 0.7ml
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。实验方法原理盐酸胍或脲都能使蛋白质变性，选用哪一种取决于不同的激酶，但一般首选盐酸胍，因为对大多数激酶而言它的变性效果更好。实验材料10 mmol L 激酶底物有激酶活性的酶样品试
试剂、试剂盒Tris-HClDTT盐酸胍尿素激酶分析缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤1. 准备下列材料：SDS-PAGE 要用到的所有试剂50 mmol/L Tris-HCl，室温（pH 8.0)，1 mmol/L DTT6 mol/L 盐酸胍，50 mmol/L Tris-HCl，室温（p
核酸探针根据核酸的性质，可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。 分子生物研究中，最常用的探针即为双链DNA
互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。 杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方
基本方案 直接分析 实验方法原理 盐酸胍或脲都能使蛋白质变性，选用哪一种取决于不同的激酶，但一般首
用于检测植物组织RNA的原位杂交法（一）组织切片制备l 植物组织的甲醛固定和包埋1．将植物组织切成小块，立即放入一个装有10～50ml固定剂溶液的烧杯中，把烧杯放到真空脱水机内。调节真空度以形成一个温和的真空，然后慢慢恢复常压。微量便于固定
实验方法原理将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交，然后通过放射自显影将杂交位点显影。实验材料糖原琼脂糖二硫苏糖醇二硫苏糖醇试剂、试剂盒焦碳酸二乙酯DEPC-水酚-氯仿-异戊醇乙酸钠无水乙醇层析柱流动相缓冲液苯酚氯仿-界戊醇闪烁液组织洗涤液NaCl-DEPCEDTA蛋白酶K缓冲液蛋白酶
实验方法原理 盐酸胍或脲都能使蛋白质变性，选用哪一种取决于不同的激酶，但一般首选盐酸胍，因为对大多数激酶而言它的变性效果更好。实验材料 10 mmol L 激酶底物有激酶活性的酶样品试剂、试剂盒 2-丙醇Tris•Cl盐酸胍 脲DTTTween 20匹配的激酶反应缓冲液 Mg／ATP 溶液 [γ-3
Day 1Set up an overnight culture in 100 ml LMM broth or 100 ml terrific broth containing 100ul 100 mg/mlAmpDay 2Add 40-50 ml o/n culture to 1 lt terri
Preparation of Segmented and Polarity Marked Microtubules Segmented and polarity-marked microtubules are very useful for many different types of&
实验方法原理还原型抗坏血酸（AsA）可以把铁离子还原成亚铁离子，亚铁离子与红菲咯啉（4,7-二苯基-1,10-菲咯啉，BP）反应形成红色螯合物。在534nm 波长的吸收值与AsA含量正相关，故可用比色法测定。脱氧抗坏血酸（DAsA）可由二硫苏糖醇（DTT）还原成AsA。测定AsA总量，从中减去还
一、反复冻融法：1. 将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。2. 至少3次以上冻溶。3. IFCC推荐法：收集细胞悬液，4℃低温离心（3000rpm，5min），弃上清，加入一定量PBS（
Segmented and polarity-marked microtubules are very useful for many different types of in vitro assays. Segmented microtubules are microtubu
实验方法原理 将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交，然后通过放射自显影将杂交位点显影。 实验材料
实验方法原理 将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交，然后通过放射自显影将杂交位点显影。 实验材料
一、反复冻融法：1、将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。2、至少3次以上冻溶。3、IFCC推荐法：收集细胞悬液，4℃低温离心（3000rpm，5min），弃上清，加入一定量PBS（200ul），轻轻吹打混匀，-200C 冷
Flow cell assays are very useful for studying microtubule motility, microtubule dynamics, kinetochore-microtubule interactions and action of severing/