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LncRNA:从“转录噪声”到科研高地的逆袭

2002年日本学者Okazaki在对小鼠cDNA文库进行测序时,第一次发现并鉴定了一类较长的转录产物,并将其命名为长链非编码RNA,也就是我们所知的LncRNA。然而在这种非编码RNA被发现后的很长时间里,由于它不参与蛋白质的编码,当时认为不具有生物学功能,科学家们都普遍认为lncRNA仅仅是基因的“转录噪声(transcriptional noise)”。相比于过去十年间sncRNA(短链非编码RNA,包括microRNA、siRNA、snoRNA 和 PiwiRNA等)的风生水起,lncRNA由于序列长度,研究方法的限制而受到了忽视。 一般认为,长度大于200nt的ncRNA就可以定义为LncRNA,这是一种和信使RNA结构相似的,缺乏开放阅读编码框的非编码RNA,是RNA聚合酶II的转录产物,主要分布在细胞核和细胞质中。根据lncRNA 编码转录物的长度,lncRNA可以大致分为五类:lncRNA、基因间区长链非编码......阅读全文

Nature:RNA 修饰研究有助表观转录组学进一步发展

  这是一个与 mRNA 结合的细菌核糖体的分子模式图,该核酸蛋白复合体正在合成蛋白质。  随着科研人员逐渐揭开 RNA 修饰的奥秘,帮助我们了解表观转录组学(epitranscriptomics)的工具也变得越来越多了。  2004 年,以色列特拉维夫大学(Tel Aviv University

《细胞》子刊11篇文章重磅回顾,这些年兴起的大牛技术

  还记得CRISPR-Cas9基因组编辑技术,cryo-EM,甚至高通量测序技术未出现之前,我们是怎样进行研究的吗?其实大家不用回忆太久,因为这不是很久以前的事。在过去几年间,生物学研究技术进步步伐快的让人难以置信。  Cell出版社旗下Molecular Cell杂志推出了技术特刊,介绍了新技术

基于单细胞测序绘制肿瘤微环境相关细胞代谢图谱

  肿瘤作为一个异常复杂的“生态系统”,不同类型的肿瘤细胞与非肿瘤细胞共同构成了肿瘤微环境。肿瘤存在肿瘤间异质性和肿瘤内异质性,可以说肿瘤内每种细胞都存在于不同的微环境中,每种细胞都可能有不同的代谢状态。由于异质性,肿瘤细胞会通过改变自身代谢模式(即“代谢重编程”)来适应不同的微环境,以满足其对能量

Nature Biotechnology:可取代ChIP-seq的新技术

  生物体内的所有细胞都携带着相同的遗传物质——DNA。不同细胞读取和表达不同的部分,从而实现特异性的功能。比如说,神经细胞表达的基因帮助它们给其他神经细胞传递信息,而免疫细胞表达基因帮助它们合成抗体。  这样的基因表达受到转录因子的控制,但人们一直很难定位功能性转录因子在DNA上的结合位点。之前的

解读单细胞RNA-seq技术

  多年来,跟踪一个单细胞的转录组,超出了我们的能力。但是现在,时代已经变了,新的单细胞RNA-seq方法,可以分析大量的细胞及它们的命运。  我们都参加过大型生日派对:在拥挤的房间里,与许多人聊天、吃饭和庆祝。但是,试想你并不知道寿星是谁,只是像一个局外者看待这个派对。你可能会觉得整个事件看起来与

解读单细胞RNA-seq技术

多年来,跟踪一个单细胞的转录组,超出了我们的能力。但是现在,时代已经变了,新的单细胞RNA-seq方法,可以分析大量的细胞及它们的命运  多年来,跟踪一个单细胞的转录组,超出了我们的能力。但是现在,时代已经变了,新的单细胞RNA-seq方法,可以分析大量的细胞及它们的命运。  我们都参加过大型生日派

新型超微量染色质免疫共沉淀ChIP-seq技术-Cut&Tag

  文章导读   染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation , ChIP)是研究蛋白质与DNA互作的标准方法。通过与高通量测序技术相结合,研究者开发了ChIP-seq技术,从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的DNA片段信息,目前被广泛应用于转录调控、

新型超微量染色质免疫共沉淀ChIP-seq技术-Cut&Tag

  染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation , ChIP)是研究蛋白质与DNA互作的标准方法。通过与高通量测序技术相结合,研究者开发了ChIP-seq技术,从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的DNA片段信息,目前被广泛应用于转录调控、表观遗传等研究领

基因筛查进入单细胞时代

  遗传筛选是生物学中最有力的工具,它可以阐明复杂的生物过程。最近四项研究已经开发了一个新的遗传分析方法,通过使用单个细胞作为微观实验室,测定扰动。这些研究开发了CROP-seq、PERTURB-seq和CRISP-seq技术,克服了现有基因筛查方法的局限性,并且可以分析一些原本无法分析的样本。  

新型超微量染色质免疫共沉淀ChIP-seq技术-Cut&Tag

1.Cut&Tag原理ChiTag是Protein A蛋白与Tn5转座酶的融合蛋白,当抗体结合目的蛋白(如转录因子、组蛋白等)后,Protein A蛋白可直接结合抗体,携带的Tn5转座酶可特异性的切割目的蛋白附近的DNA片段,并将DNA片段连上接头,文库构建后进行高通量测序。图1 Cut&a

2017年不能错过的长非编码RNA研究推荐

  2017年即将过去,这一年的非编码RNA研究取得了很多重磅级成果。与早先的主要是在不同类型的疾病(癌症)中大规模鉴定非编码RNA,今年的研究是对非编码RNA机制的更深入探索,给我们展现了作用方式更丰富多彩的非编码RNA世界。图片来源于网络  一 长非编码RNA(lncRNA)  长非编码RNA是

单细胞技术让这些研究成为现实

  生物通报道 如今,细胞群体的平均值数据已不再能够满足研究的需求。研究人员开始转向单细胞来探索基本的生物学。在这一期的《BioTechniques》上,Jeffrey Perkel博士介绍了让单细胞实验成为现实的技术。  2015年底,巴西卫生部门和世界卫生组织报告,新生儿中小头症的发病率急剧增加

单细胞技术让这些研究成为现实

  如今,细胞群体的平均值数据已不再能够满足研究的需求。研究人员开始转向单细胞来探索基本的生物学。在这一期的《BioTechniques》上,Jeffrey Perkel博士介绍了让单细胞实验成为现实的技术。  2015年底,巴西卫生部门和世界卫生组织报告,新生儿中小头症的发病率急剧增加。没过多久,

中国学者发表117篇CNS文章:清华大学16篇冷冻电镜成果

  截至2019年8月26日,中国学者在Cell,Nature及Science在线发表了117篇文章,iNature团队对于这些文章做了系统的总结:  按杂志来划分:Cell 发表了18篇,Nature 发表了53篇,Science 发表了46篇;  按是否有合作单位划分:其中有54篇文章由独立的一

Nature子刊发表单细胞基因组学重要进展

  最近,一种用于RNA序列分析的新方法,可让研究人员确定新的细胞亚型,从看似全然混乱的状态创造出秩序。这项新技术发表在最新一期的Nature旗下子刊《Nature Biotechnology》,是由欧洲生物信息研究所欧洲分子生物学实验室(EMBL-EBI)的科学家开发,标志着我们向单细胞基因组迈进

利用荧光光镊系统对Cas9脱靶效应进行实时可视化评估

CRISPR-Cas9作为一种有效的基因编辑方法,在疾病预防与治疗中具有巨大的潜能,但是在临床转化中必须要考虑到它的脱靶效应。传统的生物学手段如电泳或测序等,虽然也可以用来研究Cas9的靶向性,但是其结果大多数为静态的、平均的。2019年3月发表在Nature Structural and Mo

《Nature》3月最受关注的十篇论文

  英国著名杂志《Nature》周刊是世界上最早的国际性科技期刊,自从1869年创刊以来,始终如一地报道和评论全球科技领域里最重要的突破。其办刊宗旨是“将科学发现的重要结果介绍给公众,让公众尽早知道全世界自然知识的每一分支中取得的所有进展”。近期《Nature》下载论文最多的十篇文章(2017年2月

11月23日《科学》杂志内容精选

    地球环境噪音披露内部深处的线索  一种基于地震噪声,即地球的集体“嗡嗡声”的新技术正在帮助科学家们探索我们行星的内部深处。地球的表面受到了大气压变化、海浪、雨、风和喧闹的人类活动的持续性的轰击。这些力产生了作为地球背景噪声一部分的地震波。人类无法听到地震噪声,但我们可以看到它

深圳大学发3篇Science及Nature,综合排名首次进入全球500强

  在2019年,深圳大学获得345项国家自然科学基金的资助,资助总额度达到1.47亿,进入了全国20强。另外,对于全球高校综合排名,深圳大学首次跨入全球500强(点击阅读)。深圳大学正在不断崛起,在2019年(截至2019年8月23日),深圳大学发表了2篇Science,1篇Nature:  20

荧光RNA随机引物触发的聚合酶链反应实验

差异显示聚合酶链反应(PCR) 可促进在诸多物种中与污染暴露相关的新分子标志物的鉴定。至今,已有多种差异显示方法被详细描述。这里,我们描述了一种改良的RNA 随机引物触发的 PCR 方 法(RNAarbitrarily primed PCR, RAP-PCR) , 主要涉及通过 罗 丹 明(rhod

荧光RNA随机引物触发的聚合酶链反应实验

实验步骤 ##一、 从组织和培养细胞中分离RNA1.TRIzol试 剂(Invitrogen)。该试剂含有苯酚和硫氰酸盐化合物,操作时应穿实验服,戴手套,存放于 4°C 。2.氯仿。3.异丙醇。4.乙醇。5.焦炭酸二乙酯(DEPC) 处理的水

荧光RNA随机引物触发的聚合酶链反应实验(二)

##六、从组织或培养细胞提取 RNARNA可以从各种来源的样本包括培养的细胞(例如神经元细胞、肝细胞等)和组织中分离得到(见 注 释 1) 。 mRNA 的 纯 化 对 FRAP-PCR 方法来说并不需要,因为mRNA 仅占细胞总 R N A 的 3 % 〜5 % (13)。因而在本章所描述

人造锌指蛋白的设计和合成实验

人造锌指蛋白的设计和合成             实验材料 寡核苷酸引物

人造锌指蛋白的设计和合成实验

实验材料 寡核苷酸引物试剂、试剂盒 氨苄青霉素磷酸缓冲生理盐水Tris-氯化氢SDS-PAGE仪器、耗材 DNA 测序仪色谱设备实验步骤 本节描述的方法大概包括:( 1 ) 设计的锌指蛋白的表达和纯化。( 2 ) 人工锌指设计技巧。( 3 ) 人工锌指构建步骤。( 4 ) 锌指结构和金属配位的确认。

人造锌指蛋白的设计和合成实验

在 DNA 结合模体中,(Cys)2(His)2 类型的锌指模体具有大的操控潜力。为新的 DNA 结合蛋白设计,锌指模体提供了有吸引力的框架。特别是为产生新的、具有全新的 DNA 结合特性的,如长 DNA 链识别、DNA 弯折和 AT 富集序列识别——人造锌指蛋白。本实验来源「现代蛋白质工