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荧光分析的简史

早在1575年,就有人在阳光下观察到菲律宾紫檀木切片的黄色水溶液呈现极为可爱的天蓝色。1852年G. G. 斯托克斯用分光计观察奎宁和叶绿素溶液时,发现它们所发出的光的波长比入射光的波长稍长,由此判明这种现象是由于这些物质吸收了光能并重新发出不同波长的光线,而不是由于光的漫射作用引起的。斯托克斯称这种光为荧光。这一名词由发生荧光的矿物萤石(fluorite)衍生而来。20世纪50年代前使用滤片式荧光计,只能测量荧光的总光度值。1955年制成第一台荧光光度计。60年代开始了真实荧光光谱、荧光效率和荧光寿命的测量。70年代引进了计算机技术、电视技术、激光技术、显微镜技术。80年代,荧光分光光度计大多配有微型计算机-数据处理器,能对荧光光度值进行积分、微分、除法、减法和平均等运算。......阅读全文

荧光造影分析

1.臂一视网膜循环时间(arm-retina circulation time ,A-Rct )荧光素从肘前静脉注射后,经右心→左心→主动脉→颈总动脉→颈内动脉→眼动脉而到眼底,为时7~12秒(但亦有长达15~30秒者),两眼相差不能超过0.5~1秒。2.视网膜血循环的分期及荧光形态荧光素钠经眼动脉

激光荧光分析

激光荧光分析采用发射光强度大,波长更纯的激光作光源,该光源大大提高了荧光分析方法的灵敏度和选择性。利用激光光源的相干性可以产生非常理想的辐射,以激光为光源可以使仪器仅仅使用一个单色器,加上利用可调谐激光器的可调功能获取激发光谱发射光谱。目前,激光诱导荧光分析法已经成为分析超低浓度物质的灵敏而有效的方

同步荧光分析

同步荧光分析由Lloyd首先提出,它与常用荧光测定最大的区别是同时扫描激发和发射两个单色器波长,由测得的荧光强度信号与对应的激发波长(或发射波长)构成光谱图,即同步荧光光谱。按光谱扫描方式的不同,同步荧光分析可以分为恒(固定)波长法、恒能量法、可变角法和恒基体法。同步荧光分析具有光谱简单,谱带窄、分

偏振荧光分析

任何物质都处于不断运动中,液体环境中的荧光分子也不例外。因此当受到偏振光激发时,荧光分子的运动状态(如旋转或翻转)、荧光分子与其他因子相互作用(如相互结合或排斥)、其所处环境的性质(如溶液的黏度、温度_等因素都可能对荧光分子受激发后发出的偏振光的性质产生影响。对此进行分析比较,就可能揭开物质活动的内

荧光免疫分析

免疫分析是基于蛋白抗原和抗体之间、或者小分子半抗原与抗体之间的特异反应的分析方法,是生物分析化学的重要内容之一。其中,用荧光物质作为标记的免疫分析即为荧光免疫分析。作为荧光标记物,应具有高的荧光强度,其发射的荧光与背景荧光有明显区别;它与抗原或抗体的结合不破坏其免疫活性,标记过程要简单、快速;水溶性

低温荧光分析

通常荧光分析都在室温下进行,荧光光谱为带光谱,由于各种变宽因素,谱带往往较宽。自然界有许多有机化合物,其化学结构颇为接近,而且各存在着多种同分异构体和衍生物,它们的光谱往往相互重叠,难以鉴别表征以及定量测定。环境因素对分子荧光会产生显著的影响,温度是其中一个主要因素。随着温度的降低,介质黏度增大,荧

荧光分析特点

(1)分子荧光光谱分析的主要特点是灵敏度高、选择性好,荧光分析的灵敏度要比吸收光谱测量高2-3个数量级。分光光度法通常在 10-7 级 ,而荧光的灵敏度达10-9。(2)强选择性强,荧光物质具有两种特征光谱:激发光谱和吸收光谱,相对于分光光度法单一的吸收光谱来说,荧光光谱可根据激发光谱和发射光谱来鉴

荧光光谱仪的偏振荧光分析和时间分辨荧光分析

  1、偏振荧光分析。荧光体的荧光偏振与荧光各向异性值的测定,能够提供与荧光体在激发态寿命期间动力学相关的信息,因此荧光偏振技术被广泛应用于研究分子间的作用,例如蛋白质与核酸、抗原与抗体、蛋白质与多肽的结合作用等。  2、时间分辨荧光分析。由于不同分子的荧光寿命不同,可在激发与检测之间延缓一段时间,

概述荧光分析的分析方法

  直接测定法  利用物质自身发射的荧光进行测定分析。  间接测定法  不管是直接测定,还是间接测定,一般的采用标准工作曲线法,取各种已知量的荧光物质,配成一系列的标准溶液,测定出这些标准溶液的荧光强度,然后给出荧光强度对标准溶液的浓度的工作曲线。在同样的仪器条件下,测定未知样品的荧光强度,然后从标

荧光光谱的荧光分析的特点

灵敏度高:荧光分析的最大特点是灵敏度高,通常情况下要比分光光度计的灵敏度高出2-3个数量级。选择性强:包括激发光谱和发射光谱,在鉴定物质时,通过选择波长可以使分子荧光分析有多种选择。试样量少和方法简便。能提供比较多的物理参数:如激发光谱、发射光谱、荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等参数。这些参