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拟南芥叶绿体蛋白质组学分析实验

试剂、试剂盒 HEPES-KOH山梨醇抗坏血酸维生素 C半胱氨酸PF-Percoll仪器、耗材 浓缩离心设备实验步骤 建议在短日照条件下培养材料以诱导营养生长，并在照光的早期收取材料以提高获得完整叶绿体的产率。所以试剂应在收集材料之前准备好，并连同其他一些设备，如离心机转头及离心管等在冰箱或冰上冷却至 0~4°C。为避免叶绿体过多地暴露于光下或破碎，所有操作应尽可能在绿光下迅速完成。整个分离过程 30~40 min 可以完成。( 1 ) 在 10 h 光照（23°C ) / 14 h 黑暗（17°C ) 光周期条件下培养拟南芥材料 5~6 周，开花前收取叶片。( 2 ) 配制所有溶液，并连同所有设备（包括离心机以及转头）一起冷却至 0~4°C。( 3 ) 剪取植物叶片（见注释 2) ，并用蒸馏水清洗以确保没有土壤附着。( 4 ) 按每 10 g 材料加 100 ml 匀浆缓冲液（介质 A ) 的比例将材料和预冷的缓冲液混和在......阅读全文