WIKI资讯
WIKI资讯
实验原理： 利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种：瞬时转染和稳转株筛选。通过稳定细胞系构建筛选稳定表达细胞株。针对瞬时转染，外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量较少，能够满足小量蛋白制备，大量生产成本很高。相对于此，稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上，随着细胞的生长分裂外源基因可以稳定转染表达，同时经过抗生素加压筛选，最终得到能够稳定转染表达蛋白的细胞株，稳转株生产蛋白稳定性更好，批次差异性更小。 稳定转染的应用 稳定转染适用原因 稳定转染应用 外源基因要整合到细胞染色体上 基因敲除以及基因插入突变筛选等修饰基因组的研究 细胞之间存在个体差异，同一类型细胞，不同个体细胞 基因组存在差异，会对实验结果造成干扰 单克隆稳转株筛选 外源基因未整合到细胞会导致注射入动物体内后，外源 基因片段很快丢失 需要在动物体体内注射已经表达外源基因的细胞 一些蛋白稳定......阅读全文
近年来，随着生物药市场和基因工程技术的发展，重组治疗性抗体或者单抗的需求在生物药中的比例也逐年上升。重组mAbs被应用于包括癌症及免疫系统缺陷在内的许多疾病的治疗当中。 重组mAbs通过基因工程技术改造后可以在多种宿主细胞表达。重组mAbs在表达后进行翻译后修饰、蛋白质折叠、组装及适当的糖