刘允才教授PNAS解析免疫调控新途径
来自美国拉霍亚过敏和免疫学研究所(La Jolla Institute for Allergy & Immunology, La Jolla, CA)，中科院上海生化与细胞研究所的研究人员利用一种体内敲除技术，分析了蛋白Neddylation在调控T细胞功能上的作用，为炎症疾病治疗提供了一种可能的治疗性靶标。相关成果公布在《美国国家科学院院刊》(PNAS)杂志上。 文章的通讯作者是拉霍亚过敏和免疫学研究刘允才(Yun-Cai Liu，音译)教授，其早年毕业于北京农业大学，2009年成为拉霍亚过敏和免疫学研究所正教授。2009年至今担任Molecular and Cellular Biology和Journal of Immunology的编辑。其研究主要是通过标记泛素蛋白研究淋巴细胞的功能，至今发表论文近30篇。 NEDD8 (neural precursor cell-expressed d......阅读全文
细胞因子免疫学检测法
细胞因子均为蛋白或多肽，具有较强的抗原性。随着重组细胞因子的出现，可较方便地获得细胞因子的特异性抗血清或单克隆抗体，因此可利用抗原抗体特异性反应的特性，用免疫学技术定量检测细胞因子。尽管细胞因子种类繁多，只要获得了针对某一因子的特异性抗体（包括多克隆抗体或单克隆抗体）均可采用相似的技术开展工作。
免疫学检测法检测细胞因子
细胞因子均为蛋白或多肽，具有较强的抗原性。随着重组细胞因子的出现，可较方便地获得细胞因子的特异性抗血清或单克隆抗体，因此可利用抗原抗体特异性反应的特性，用免疫学技术定量检测细胞因子。尽管细胞因子种类繁多，只要获得了针对某一因子的特异性抗体（包括多克隆抗体或单克隆抗体）均可采用相似的技术开展工作。
免疫学检测法检测细胞因子知识点来了！
细胞因子均为蛋白或多肽，具有较强的抗原性。随着重组细胞因子的出现，可较方便地获得细胞因子的特异性抗血清或单克隆抗体，因此可利用抗原抗体特异性反应的特性，用免疫学技术定量检测细胞因子。 尽管细胞因子种类繁多，只要获得了针对某一因子的特异性抗体（包括多克隆抗体或单克隆抗体）均可采用相似的技术开展工
免疫学细胞因子的定量检测，Elispot酶联斑点分析技术 五
ELISPOT 实验方案 对应BD的试剂盒 实验材料的准备 试剂盒中没有但是必须的 材料: • 已消毒的移液器 (Gilson)。单道20ul,100ul,200ul,1ml, 8/12道200ul • 无菌一次性聚苯乙烯吸量管 (1ml, 5ml, 10ml）(Axygen)。
免疫学细胞因子的定量检测，Elispot酶联斑点分析技术 一
ELISPOT技术原理 在免疫学领域中，对于疾病以及疫苗研究不仅仅局限于体液免疫应答（B细胞免疫），细胞介导的免疫应答(cell mediated immune response，CMI)也是人们所关注的，而T细胞在CMI中起关键作用。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ELISA）检测
免疫学细胞因子的定量检测，Elispot酶联斑点分析技术 六
6. 取出封闭2h的ELISPOT板，吸弃每孔中的封闭液。(不要洗板！) 7. 在ELISPOT板中，先加30μl 无血清培养基(12道排枪)和20μl肽库(8道排枪)，后加50μl细胞(8道排枪) (每孔活细胞总数为2×105，每个病人需活细胞总数为10×106，体积
免疫学细胞因子的定量检测，Elispot酶联斑点分析技术 二
（2） ELISPOT 技术的现在 1996年以来随着抗体制备、PVDF膜材篁等技术改良，ELISPOT 分析技术已经逐渐达到科研人员的期待，它已是当世公认最灵敏抗原特定T细胞的体外检测技术。藉由检验新鲜分离PBMC细胞所分泌cytokine的指纹，ELISPOT 分析技术可提示T细胞免疫系统的两
免疫学细胞因子的定量检测，Elispot酶联斑点分析技术 四
ELISPOT 分析使单细胞分泌产物可视化。这些分析异常敏感，因为它是在直接在分泌细胞的周围进行捕捉，而且是在表面被冲淡，或者被临近的细胞上的受体捕获，或降解之前。最低至1：100万细胞精度的活体外频率测量。这种分辨率已经远远超过使用细胞内细胞因子的四聚物染色和ELISA法测量的精度。这种高敏感度是
免疫学细胞因子的定量检测，Elispot酶联斑点分析技术 三
（3） 用含体积比0.01%Tween-20的PBS洗6次，以弃去细胞，加入生物素化抗细胞因子的检测抗体，孵育3h。再洗6次后，加入AP或HRP标记的链亲和素，室温孵育3h。 （4） 用PBS-Tween-20 再洗5次，加入底物 室温下显色，待出现紫色(AKP和底物的产物)或红色(HRP和底物的
细胞因子受体、细胞因子与疾病
1.细胞因子受体 细胞因子通过结合特异性受体发挥生物学作用。细胞因子受体均为跨膜分子，由胞膜外区、跨膜区和胞质区组成。细胞因子和细胞因子受体的结合后启动细胞内的信号转导，使细胞发生分化或功能改变。 多种细胞因子受体都有非膜型的游离受体。 趋化因子受体CCR5是HIV的受体。 2.细胞因子