Antpedia LOGO WIKI资讯

华大基因研究显示致命大肠杆菌或起源于德国

据新华社深圳6月5日电 (记者 王攀)深圳华大基因研究院5日公布最新研究结果表示,引起欧洲疫情爆发的病原菌或起源于2001年在德国分离到的肠出血性大肠杆菌。 该院研究小组通过多位点测序分型,发现引起此次爆发的菌株与2001年德国分离株01-09591及2002年的中非分离株55989有高度相似性。这三株菌具有7个完全相同的“看家基因”,(“看家基因”是维持细胞最低限度功能所不可少的基因,被广泛用于细菌分类),从而得出结论该三类大肠杆菌为同一类型(ST678)。 根据这个发现,研究小组对这三株菌展开进一步调查,以追溯此次爆发的源头。通过对大肠杆菌的12个毒力基因/适应基因分析发现,2001年德国分离株与今年的爆发菌株完全吻合,而中非菌株与两株德国菌株相比,缺少了志贺毒素基因和抗亚碲酸盐基因。 研究人员据此推断,德国2001年分离株很有可能是这次爆发菌株的直接祖先。抗生素抗性试验结果表明,经过10年的进化,2011年的菌株......阅读全文

大肠杆菌基因组基因无痕敲除的优化方法

  近几十年来, 大肠杆菌是基因工程、 代谢工程和合成生物学等领域的重要工具菌株,是生产重组蛋白、氨基酸、有机酸、能源物质和一些重要化工产品的主力微生物之一。为使大肠杆菌获得新的性状和生产能力, 基因敲除及基因敲入是构建新型大肠杆菌的重要手段。   近几十年来, 大肠杆菌是基因工程、 代谢工程和合成

克隆基因的表达(expression of cloned gene)-2

在双链 DNA 分子中,只有一条链转录成 mRNA,这条链称为有意义链(sense strand),该基因的另一条链则称反意义链(antisense strand)。在含有许多基因的 DNA 双链中,每个基因的有意义链并不是在同一条 DNA 链上。也就是说,一条链上既具有某些基因的有意义链,

外源基因在原核细胞中的表达系统

外源基因在原核细胞中表达是基因工程操作中最初取得成功的途径。1 原核生物基因表达的特点同所有的生命过程一样,外源基因在原核细胞中的表达包括两个主要过程:即 DNA转录成mRNA和 mRNA翻译成蛋白质。与真核细胞相比,原核细胞的表达有以下特点:①原核生物只有一种RNA 聚合酶(真核细胞有三种)识别原

E.coli基因文库的分类和选择

自 1995 年成立以来,Dharmacon 在生物信息学,RNA 生物学和合成化学方面的专长 , 使我们能够开发出一整套研究基因功能的产品。作为 RNA 定制合成的leader,Dharmacon 公司是 RNA 干扰新发现领域的早期参与者,并且在若干重要的科学发现中,以及确保沉默效率的

E.coli基因文库的分类和选择

文库种类Dharmacon 大肠杆菌资源库包括大肠杆菌Keio基因敲除文库,监测基因表达的启动子-GFP融合文库,以及用于研究蛋白质-蛋白质相互作用的标记ORF文库。大肠杆菌(E.coli)基因cDNA&ORF文库 (1)大肠杆菌Keio基因敲除文库(E.coli Keio Kno

DNA重组(DNA recombination)技术:外源基因的蛋白表达-1

通过外源DNA的重组、克隆、以及鉴定,可以获得所需的特异DNA克隆。外源克隆基因在某种表达载体及适宜的宿主细胞中可表达为相应的蛋白质,这就组成了外源基因的蛋白表达系统。表达后的蛋白质必须具有原来的生物学活性,这是基于正确的基因转录、转录后加工、mRNA翻译及翻译后修饰,同时与表达载体的结构和表达体系

大肠杆菌基因型及遗传符号说明系列一

实验室的一般大肠杆菌拥有4288条基因,每条基因的长度约为950bp,基因间的平均间隔为118bp(基因Ⅷ)。E.coli基因组中还包含有许多插入序列,如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组份的片段,这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的,由此表明了基因组具有它的可塑造性。利用大肠杆菌基因组

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

杆状病毒-昆虫细胞表达系统2

五、亲代杆状病毒基因组的改进就像转移质粒的改进,对亲代杆状病毒基因组的改进也是为了满足各种不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重组杆状病毒载体构建和分离低效率的方法,这也是最初的杆状病毒-昆虫细胞系统存在的主要问题。现在已经知道这个问题的根源在于, 在共转染的昆虫细胞系中,转移质粒和亲代杆状病毒

新方法使“基因剪刀”更易使用

  一个国际科研团队设计出一种运用“基因剪刀”的新方法,可快捷高效地对大肠杆菌等常用科研生物进行基因编辑,降低基因研究的技术门槛。   近来兴起的“基因剪刀”技术能让研究人员像在电脑上编辑文档一样,精确查找某个基因在基因组中的位置,进行删除或修改。目前主流的“基因剪刀”是CRISPR技术,相关工具

新方法使“基因剪刀”更易使用

  一个国际科研团队设计出一种运用“基因剪刀”的新方法,可快捷高效地对大肠杆菌等常用科研生物进行基因编辑,降低基因研究的技术门槛。   近来兴起的“基因剪刀”技术能让研究人员像在电脑上编辑文档一样,精确查找某个基因在基因组中的位置,进行删除或修改。目前主流的“基因剪刀”是CRISPR技术,相关工具

新方法使“基因剪刀”更易使用

  一个国际科研团队设计出一种运用“基因剪刀”的新方法,可快捷高效地对大肠杆菌等常用科研生物进行基因编辑,降低基因研究的技术门槛。   近来兴起的“基因剪刀”技术能让研究人员像在电脑上编辑文档一样,精确查找某个基因在基因组中的位置,进行删除或修改。目前主流的“基因剪刀”是CRISPR技术,相关工具

用λ噬菌体 PL 启动子在大肠杆菌中表达克隆基因实验

            实验材料 载体和细菌菌株 PL 表达载体 阳性对照质粒 试剂、试剂盒

权威期刊发布宏基因组测序新法

  阐明哺乳动物肠道共生微生物基因的功能,具有挑战性,因为许多共生菌在实验室很难培养和遗传操作。最近,来自哈佛-麻省理工卫生科学与技术部(Harvard‐MIT Division of Health Sciences and Technology)、哥伦比亚大学、哈佛大学医学院及附属布里根妇女医院的

新方法使“基因剪刀”更易使用

  一个国际科研团队设计出一种运用“基因剪刀”的新方法,可快捷高效地对大肠杆菌等常用科研生物进行基因编辑,降低基因研究的技术门槛。相关论文日前发表于《自然—通讯》杂志。图片来源于网络  近来兴起的“基因剪刀”技术能让研究人员像在电脑上编辑文档一样,精确查找某个基因在基因组中的位置,进行删除或修改。目

用λ噬菌体 PL 启动子在大肠杆菌中表达克隆基因实验

实验材料 载体和细菌菌株PL 表达载体阳性对照质粒试剂、试剂盒 考马斯亮蓝染色溶液或银染溶液L-色氨酸SDS 凝胶加样缓冲液SDS-聚丙烯酰胺凝胶靶基因或 cDNA 片段LB 琼脂平板LB 培养基M9 基本培养基仪器、耗材 SorvallGSA 转头或相当的转头沸水浴振荡培养器实验步骤 材料缓冲液和

德中联合研究称德国肠道病系新型病菌引发

  据德国媒体6月2日报道,德国和中国的一项联合基因研究初步显示,导致最近德国肠出血性大肠杆菌(EHEC)疫情的致病菌是包含两种不同菌种基因的新型病菌。  德国汉堡-埃彭多夫大学医学院细菌专家罗德在接受德新社采访时说,该医学院与中国研究人员的联合研究发现,造成此次肠出血性大肠杆菌疫情的病菌

用λ噬菌体 PL 启动子在大肠杆菌中表达克隆基因实验

λ噬菌体 PL 启动子是受控于温度敏感阻抑物(cIts857) 的强效启动子,阻抑物可在低温下阻抑 PL 启动子的转录,但在髙温下不能。因此带有λ噬菌体启动子的载体必须以带有 cIts857 基因的菌株作为宿主。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布

基因克隆的四大要素(Four Elements for Gene Cloning)

一、受体细胞 :受体细胞的选择是否合适将关系到能否表达,特别是高效表达。首先要注意不同的表达载体与受体细胞的关系,即原核表达载体适合原核细胞,真核载体则适合真核细胞,而农杆菌仅适用于植物细胞。即使大肠杆菌质粒,也应注意选择合适的菌种。例如,当用含有T7 噬菌体启动子的载体表达外源基因时,由于T7

细菌和噬菌体的遗传分析 2

转化过程可分为几个步骤: (1)双链DNA分子和细胞表面感受位点可逆性的结合; (2)供体DNA片段被吸入受体细胞; (3)侵入受体细胞的供体双链DNA转变成单链形式,其中的一条链被降解; (4)未被降解的一条链部分或 整个插入受体细胞的DNA 链,形成杂合的DNA分子;

克隆启动子的方法

随着基因工程的发展,常常需要构建一种能高水平表达异源蛋白质的表达载体。启动子对外源基因的表达水平影响很大,是基因工程表达载体的重要元件。因此研究启动子的克隆方法,对研究基因表达调控和构建表达载体至关重要。迄今为止,国外尚未见到有关启动子克隆方法的综述性报道,国内仅孙晓红等曾就启动子的结构、分类、克隆

克隆启动子的方法

随着基因工程的发展,常常需要构建一种能高水平表达异源蛋白质的表达载体。启动子对外源基因的表达水平影响很大,是基因工程表达载体的重要元件。因此研究启动子的克隆方法,对研究基因表达调控和构建表达载体至关重要。迄今为止,国外尚未见到有关启动子克隆方法的综述性报道,国内仅孙晓红等曾就启动子的结构、分类、克隆

细菌和噬菌体的遗传分析 3

方法: 苏氨酸 亮氨酸 叠氮化钠 噬菌体 乳糖 半乳糖 链霉素 Hfr:thr+ leu+ azir tonr lac+ gal+ strs

启动子克隆方法研究进展(1)

随着基因工程的发展,常常需要构建一种能高水平表达异源蛋白质的表达载体。启动子对外源基因的表达水平影响很大,是基因工程表达载体的重要元件。因此研究启动子的克隆方法,对研究基因表达调控和构建表达载体至关重要。  迄今为止,国外尚未见到有关启动子克隆方法的综述性报道,国内仅孙晓红等曾就启动子的结构、分类、

Gateway技术:克隆、表达新方法

Gateway技术提供以下可能: 通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 同时将您的基因转移到多个表达系统 在任何您选择的系统――体外,细菌,酵母,昆虫,或哺乳动物――分析表达一、一种更好的克隆方法Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统(图1)。这项强大的体

2019年9月6日Science期刊新成果

  1.Science:新方法极大地延长细菌抗癌基因回路的功能性寿命  doi:10.1126/science.aaw0542; doi:10.1126/science.aay3157  在一项新的研究中,来自美国加州大学圣地亚哥分校的研究人员开发了一种方法,可以显著延长用于引导微生物发挥功能---

《Science》揭示大肠杆菌与癌症的神秘关联

  十多年来,科学家们一直致力于研究大肠杆菌素(一种由某些大肠杆菌菌株产生的化合物)与结直肠癌之间的联系,但由于他们无法分离出这种化合物,这种联系受到了阻碍。  所以Emily Balskus决定把注意力集中在大肠杆菌素留下的“烂摊子”上。  Balskus是化学和化学生物学教授,她和同事们是一项新

用 IPTG 诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因实验

实验材料 带有 lacIq 或 lacIq1 等位基因的适于转化的大肠杆菌菌株IPTG 诱导的表达载体试剂、试剂盒 考马斯亮蓝染色溶液或银染溶液IPTGSDS 凝胶加样缓冲液SDS-聚丙烯酰胺凝胶靶基因或 cDNA 片段LB 琼脂平板LB 培养基仪器、耗材 SorvallGSA 转头或相当的转头沸水

德国研究人员建议为欧洲肠疫致病菌更名

  一个月来在德国等欧洲国家造成大范围肠病疫情的致病菌一直被称为肠出血性大肠杆菌。但德国哥廷根大学的研究人员6月15日提出,应该将这种病菌更名为“肠聚集黏附性大肠杆菌”,以反映它的特性。   哥廷根大学研究人员说,他们对从德国汉堡两名患者身上分离出的致病菌进行了基因测序,发现它有超过96%的遗传物

世卫组织:每年有超过35万人死于食品卫生问题

  据法国媒体4月7日报道,世界卫生组织将2015年4月7日的世界卫生日主题定为“食品安全”,其针对食物卫生问题向世人发出警告:隐藏在食物、餐具中的细菌、寄生虫、病毒等会攻击人类的肠胃系统,引发200余种疾病,小到轻微的拉肚腹泻,大到可危及生命的脊髓型脑膜炎甚至是癌症。据统计,全世界每年有超过35万