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流式细胞仪原理及及其在植物上的应用和选用

摘要:随着科技水平的不断深入,科研设备的不断更新,国家对科研投入的不断增多,植物检测技术也得到了进一步的发展。流式细胞仪植物检测技术是近几年在我国刚刚兴起的一项新技术,对许多植物科技工作者来说还比较陌生。本文用比较通俗的语言介绍了进行流式细胞仪分析所必须的基本概念、发展历史、工作原理、知名品牌、常见型号及其在植物上的应用。关键词:流式细胞仪;植物;检测技术Flow CytometryZhao Hong (Beijing Vegetable Research Center,Bering 100089,China)Abstract:With the development of science,with the updating of scientific equipments,and with the increasing investment by nation,the plant measurement technologie......阅读全文

巧妙提高紫杉醇产量

图1.  InPro6880i光学氧系统在生产现场。 紫杉醇是从红豆杉属植物树皮中提取的化合物,也是目前惟一可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物,它的问世被誉为国际抗癌药物的三大成就之一。但其在树皮中含量仅有0.01%~0.06%,目前主要通过化学合成和植物细胞组织培养等

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验

实验步骤一、化学法和酶法细胞裂解微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况,而且应用这些机械的方法经常会遇到过度的产热和样品被氧化等问题。微量细胞裂解的简化方面的重大进

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验

实验步骤 一、化学法和酶法细胞裂解 微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况,而且应用这些

免疫细胞的检测方法

用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定,藉以了解机体的免疫状态,并对某些临床疾病的诊断,预后及疗效观察等也具有一定意义。一、免疫细胞的分离体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。

常用的分子生物学基本技术

核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的

免疫荧光细胞化学技术

免疫荧光细胞化学技术免疫荧光细胞化学是现代生物学和医学中广泛应用的技术之一,是由Coons等(1950)建立,经过近43年的发展,免疫荧光技术与形态学技术相结合发展成免疫荧光细胞(或组织)化学。它与亲合化学技术如葡萄球菌A蛋白(SPA)、生物素与卵白素、植物血凝素(ConA等)相结合拓宽了领域;与激

【综述】重组蛋白糖基化表征的进展与展望

  内容  1. 前言:生物制品糖基化表征的重要性  2. 糖蛋白表征用分析方法  2.1 糖基化特性  2.1.1 多糖的直接分析  2.1.2 糖谱分析  2.1.3 N-糖的异质性分析  2.1.4 单糖的分析  2.2 多糖分析用技术  2.2.1 糖分离技术  2.2.2 多糖检测技术  

酶的提取、分离、纯化及其活力测定

一、实验目的酶是植物体内具有催化作用的蛋白质,植物体内的生化反应,一般都是在酶的作用下进行的,没有酶的催化反应,植物的生命也就停止了,因此对酶的研究是阐明生命现象本质中十分重要的部分。为要研究酶首先要将酶从组织中提取出来,加以分离、纯化,不同的研究目的对酶制剂的纯度要求也不相同,有些工作只需要粗的酶

植物组织培养中的无菌技术

一、目的要求  通过实验掌握植物组织培养中的无菌操作技术。学习培养基的配制及灭菌,掌握植物外植体表面消毒的常规方法。 二、基本原理近年来,植物组织培养作为一种研究技术已被广泛。植物组织培养是应用无菌操作方法培养植物器官或组织地任何一部分,甚至单个细胞的观察。植物组织培

蛋白质提取与制备

1蛋白质提取与制备蛋白质提取与制备蛋白质种类很多,性质上的差异很大,既或是同类蛋白质,因选用材料不同,使用方法差别也很大,且又处于不同的体系中,因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的,大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中,少数与脂类结合

酶的提取、分离、纯化及其活性测定

  原理   酶是植物体内具有催化作用的蛋白质,植物体内的生化反应,一般都是在酶的作用下进行的,没有酶的催化反应,植物的生命也就停止了,因此对酶的研究是阐明生命现象本质中十分重要的部分。 为要研究酶首先要将酶从组织中提取出来,加以分离、纯化,不同的研究目的

酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法

酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法是一种在单细胞悬液中检测分泌某种特定蛋白质的细胞和定量分析产生该特定蛋白质的细胞频率的有力工具。1983年,Crekinsky等运用ELISPOT技术成功检出分泌特异性抗体的细胞频率,经过不断发展,目前该技术已广泛用于检测产生、分泌多种其他效应分子的细胞(如细胞因

年终盘点:2016年国内不容错过的重磅生物研究

  时间总是过得很快,2016年马上就要过去了,迎接我们的将是崭新的2017年,2016年,我国有很多优秀科研机构的科学家们都做出了意义重大、影响深远的研究成果,发表在国际顶级期刊上。本文中小编盘点了2016年我国科学家发表的一些重磅级研究,以饕读者。   --结构生物学 --  1.清华大学 施一

水环境污染生物监测——生物测试法(二)

2、发光细菌法(1)方法原理发光细菌是一类非致病的革兰氏阴性微生物,它们在适当的条件下能发射出肉眼可见的蓝绿色光(450~490nm)。当样品毒性组分与发光细菌接触时,可影响或干扰细菌的新陈代谢,使细菌的发光强度下降或不发光。在一定毒物浓度范围内,有毒物质浓度与发光强度成负相关线性关系,因而可使用生

细胞、细胞器及组分的分离与观察-1

叶绿体的分离与荧光观察一、实验目的了解叶绿体分离的一般原理和方法,并熟悉应用荧光显微镜方法观察叶绿体荧光现象。二、实验原理叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器,能发生特有的能量转换。利用低速离心机可以分离叶绿体,其分离在等渗溶液(0.35mol/L氯化钠或0.4mol/L蔗糖溶液)中进行,目的是为了防

中草药专用气味分析仪用于区分不同地区粗秦艽和小秦...

中草药专用气味分析仪用于区分不同地区粗秦艽和小秦艽上的应用中草药专用气味分析仪是一种气味分析仪器,又称人工嗅觉系统,是在材料科学和传感技术的基础上发展起来的,利用各种传感器的仿生学技术,模仿人类的嗅觉细胞工作模式,实现对气体、气味的检测。中草药由于不同产地、不同的品种、不同的生活环境、不同的采收期、

小结样品前处理—均质设备

在检测食品、植物、动物组织等样品的某些指标时,由于物料不是均质的,各部位的成分及污染的程度不同,必须把样品破碎混匀成均质液,然后才能将样品选用合适的检测方法进行检测。目前,我公司生产的拍击式均质器、内切式匀浆机和超声波破碎仪均可以处理不同的的样品。1.拍击式均质器HBM-400系列均质器用来将不同的

分光光度法测定叶绿素含量——分光光度法

测定叶绿素含量可应用于: (1)测定该植物的光合作用能力,也即健康状况; (2)作为数据研究以提高植物生存能力; (3)了解植物组织中叶绿素的分布及性质。实验方法原理叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物组织中,并在植物细胞中与蛋白质结合成叶绿体。当植物细胞死亡后,叶绿素即游离出来,游离叶绿素很不稳定,对光

基因的转移与重组体的筛选和鉴定-4

(3)插入表达筛选法与插入失活相反,插入表达法是外源目的基因插入特定载体后,能激活用于筛选操作的标记基因的表达,由此进行转化子的筛选。设计载体时,在筛选标记基因前面连接一段具有抑制作用的负调控序列,插入外源DNA将使该负调控序列失活,其下游的筛选标记基因才能表达。例如质粒pTR262有一个负调控的c

重金属废水处理技术工艺

重金属废水常见于电镀、电子工业和冶金工业,尤其是电镀、电子工业废水,它的成分非常复杂,除含氰(CN-)废水和酸碱废水外,根据重金属废水中所含重金属元素进行分类,一般可以分为含铬(Cr)废水、含镍(Ni)废水、含镉(Cd)废水、含铜(Cu)废水、含锌(Zn)废水、含金(Au)废水、含银(Ag)废水等。

植物组织化学显微镜标本片制作方法_石蜡切片法

实验方法原理石蜡切片技术是显微技术上最重要最常用的一种方法。其优点在于①应用范围广,几乎适用于所有的植物材料;②能将材料切成厚薄均一的切片,较清楚地显现细胞、组织的细微结构;③能切成连续蜡带,可观察细胞和组织的动态发生及层次变化过程;④切片可以长期保存,便于以后观察比较。缺点是:操作程序比较复杂,需

免疫球蛋白标记技术_酶标记抗体

免疫标记技术是用特定的物质标记抗原或抗体进行的抗原抗体反应。可借助各种仪器观察结果或进行自动化测定,可在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上,对抗原抗体反应进行定性和定位研究;或应用各种液相和固相免疫分析方法,对液体中的抗原、半抗原或抗体进行定性和定量测定。实验方法原理酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗

实验室用水知识大全

▼水中存在的杂质  •可溶性无机物:无机盐类、溶解气体、重金属、硬度成分(钙、镁等)  •可溶性有机物:木质素、单宁、腐植酸、内毒素、RNA分解酶、农药、三氯甲烷、环境荷尔蒙物质、界面活性剂、有机溶剂  •微粒子:铁锈、胶体、悬浮物、固体颗粒  •微生物:细菌类、藻类▼实验用水所要求的纯度  所谓实

检测实验室的实验用水知识大全

  水的基本性质  •1个水分子(H2O)是由1个氧原子和2个氢原子弯曲键结而成。由于正、负电荷的中心不一致,因此属于极性分子。当2个水分子同时存在时,二者会由静电交互作用与氢键结合,互相吸引并保持一定的距离。而1个水分子可以同时与4个水分子结合,形成晶体般的整齐结构。  •水分子聚合体中,由于氢键

菌种保藏的方法

  菌种是主要的生物资源,也是食用菌生产首要的生产资料。一个优良的菌种被选育出来以后,必须保持其优良性状不变或尽可能地少变慢变,才不至于降低生产性能,能长期在生产中使用。因此,菌种保藏在食用菌生产上具有重要的意义。   各种微生物由于遗传特性不同,因此适合采用的保藏方法也不一样。一种良好的有效保藏

菌种保藏的方法

  菌种是主要的生物资源,也是食用菌生产首要的生产资料。一个优良的菌种被选育出来以后,必须保持其优良性状不变或尽可能地少变慢变,才不至于降低生产性能,能长期在生产中使用。因此,菌种保藏在食用菌生产上具有重要的意义。   各种微生物由于遗传特性不同,因此适合采用的保藏方法也不一样。一种良好的有效保藏

菌种保藏的方法(二)

 (五)甘油悬液保藏法    此法是将菌种悬浮在甘油蒸馏水中,置于低温下保藏,本法较简便,但需置备低温冰箱。保藏温度若采用-20℃,保藏期约为0.5~1年,而采用-70℃,保藏期可达10年。    将拟保藏菌种对数期的培养液直接与经121℃蒸汽灭菌20min的甘油混合,并使甘油的终浓度在1

植物RNA提取实验——直接研磨法

植物RNA提取可应用于:(1)进行植物分子生物学方面的研究;(2)进行Northern杂交分析、纯化mRNA以用于体外翻译或cNDA文库构建等研究。实验方法原理通过裂解液β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后用乙醇调节结合条件

细胞培养污染的途径、危害及预防措施(二)

3 生物性污染的来源、危害及预防 外界的微生物如昆虫、节肢动物、原虫、霉菌、病毒、细菌、无细胞壁的微生物(通常指支原体)和其它类型的细胞都可能侵入培养环境引起污染。只要在一个开放的环境中进行培养,都难以避免发生污染。发生污染的可能性取决于操作方法、培养室的无菌环境以及实验室的规章制度。生物性污染对细

分子生物学常用实验技术(page 2)

一、RNA 制备   模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人