发布时间:2020-05-29 15:58 原文链接: 3分钟了解PCR逆转录注意事项

  cDNA第一链合成的反应液冰上配制。

  使用ReverTra Ace、RNase Inhibitor 等酶类时,应轻轻混匀,避免起泡;由于酶保存液

  中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。

  逆转录PCR时,提取RNA是关键,收集RNA沉淀时,离心速度不要低于13000rpm,在离心前的沉淀也尽可能在低温下条件下操作,此外逆转录酶可以选择MMLV逆转录酶,主要是因为这个条件比较容易掌握。

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