加拿大研究人员发现检测血液中癌症生物标记的新方法

据最新一期《自然·化学》杂志报道,加拿大研究人员发现了一种检测人体血液中癌症生物标记物的新方法:利用肽核酸钳及纳米微电子芯片检测游离核酸。 核酸可分为DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸),通常位于细胞内,但有时也能在循环血液中找到。癌症患者的血液中往往有更多的这种脱离细胞的核酸,其中一小部分游离核酸中就包含着与某些癌症相关的突变。 研究游离核酸的常用方法包括DNA测序和聚合酶链式反应(PCR),但两种方法都有一定缺陷。DNA测序成本高,患者往往要等待几周才能获得结果;PCR则需要准备大量样本进行修改,才能使其对基因点突变具有充分选择性。 许多遗传癌症标记会在一个特定基因中包含一个点突变。点突变是很难发现的,因为与正常游离核酸或野生型核酸相比,其在血液中的含量要小得多。科学家提高PCR灵敏度的方法之一是使用称为肽核酸的基因“钳”,这些具有互补核苷酸序列的链与野生型序列绑定后可放大目标序列。 多伦多大学和蒙特利尔儿......阅读全文

核酸突变分析方法抉择:PCR、杂交、NGS?

日前,以“精细管理、精准医疗”为主题的2016届CSCO学术年会在厦门落下帷幕,精准检测作为临床实践中实施精准医学的第一步,成为本届CSCO学术年会的热点话题。来自不同企业的分子诊断技术百花齐放百家争鸣,面对新技术与成熟技术的较量,在“精准医学”时代下,如何选择合适的检测技术,实现精准治疗成为新医学

核酸突变检测技术

基因突变是指由于DNA碱基对的置换、增添或缺失而引起的基因结构的变化,亦称点突变。它的分类方式包括1)根据基因结构的改变方式,基因突变可分为碱基置换突变和移码突变两种类型;2)根据遗传信息的改变方式,基因突变又可以分为同义突变、错义突变和无义突变三种类型。基因突变的检测方法:从基因突变的性质来看,检

核酸纯化方法

核酸抽提与纯化是分子生物学试验的基础,核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的最重要因素,也是下游分子生物学试验成败的关键。目前常见的核酸纯化方法有PC 抽提/醇沉淀方法、高盐沉淀蛋白质/醇沉淀方法、离心柱法和生物磁珠法,这几种方法各有其优势和劣势。 

测定核酸的方法

琼脂糖凝胶电泳法琼脂糖凝胶具有较大的孔径,因而适用于对较大分子的电泳分离,目前琼脂糖电泳凝胶法已成为核糖核酸和脱氧核糖核酸检测、分离和性质研究的标准手段。核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于琼脂糖浓度、核酸分子的大小以及核酸分子的形状三个因素。一般来说,较低浓度的琼脂糖凝胶适合于较大分子物质的电泳分

核酸提取分离方法

核酸提取分离方法核酸提取分为传统方法和商业化试剂抽提。传统的方法一般会采用酚/氯仿抽提及乙醇沉淀来提取核酸。商业化试剂盒方法提取核酸,比较经典的是采用离心柱法,将硅胶膜固定在离心管中,通过离心力或者负压让液体通过硅胶膜,核酸就留在膜上。在经过洗涤、洗脱的步骤得到核酸。商业化试剂盒的应用还能避免试剂污

核酸的分离方法

核酸(nucleic acid)是遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础.无论是进行核酸结构还是功能研究,首先需要对核酸进行分离和纯化.核酸样品质量将直接关系到实验的成败.核酸分离、纯化原则:1.保持核酸分子一级结构的完整性.因为遗传信息全部储存在一级结构之中,核酸的—级结构还决定其高级结构的形式以

核酸检验方法

核酸检测具体流程如下:1. 核酸提取使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存,RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。2. 逆转录合成cDNA逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs

几种核酸提取方法

 (1)浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M Nacl抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的CCL3一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及CCL3相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来. 也可用

几种核酸提取方法

几种核酸提取方法(1)浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M Nacl抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的CCL3一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及CCL3相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀

核酸的分离方法

核酸(nucleic acid)是遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础.无论是进行核酸结构还是功能研究,首先需要对核酸进行分离和纯化.核酸样品质量将直接关系到实验的成败.核酸分离、纯化原则:1.保持核酸分子一级结构的完整性.因为遗传信息全部储存在一级结构之中,核酸的—级结构还决定其高级结构的形式以

核酸提取方法大全

核酸是生物体内的高分子化合物。它包括脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)和核糖核酸(ribonucleicacid,RNA)两大类。DNA和RNA都是由一个一个核苷酸(nucleotide)头尾相连而形成的。RNA平均长度大约为2000个核苷酸,而人的DNA却是很长的,约

核酸研究提取方法升级之磁珠核酸提取

  核酸是现代生物医学研究中非常关键的研究课题,其包括核酸的结构以及核酸的功能。但是在无论做什么研究,diyi步必须对核酸进行分离与纯化。   在以前传统的分离技术中是沉淀,离心等分离过程,他们具有好多不足之处,方法繁琐,浪费时间而且结果收率低,是一个认为操作的过程,而现在运用磁珠法进行核酸提取,

核酸提取和核酸浓度、纯度的原理及方法

  【实验原理】  DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此DNA的提取也应是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。如不能有效的完成DNA提取方面的工作,那就根本谈不上进行分子生物学方面的实验。在DNA提取过程中应做到:1、根据不同研究需要,保证结构的相应

核酸检测方法有哪些

核酸检测采用咽拭子检测,有口咽拭子采样和鼻咽拭子采样两种方式。口咽拭子采样就是在咽喉部位用棉签涂擦,刷取咽喉部位上皮细胞的检测。受检测者只要放松心情,张口发出“啊——”的声音就可以了,检测过程并没有创伤风险,是非常安全的检测。检测时可能会有恶心、想要呕吐的不适感觉,不过这些不适症状通常只需要半分钟到

核酸的银染方法

核酸硝酸银染色:参考《锌对缺血再灌注大鼠肝脏金属硫蛋白一1基因表达的影响》营养学报2000年第22卷第4期294-297取PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳,所得凝胶进行硝酸银染色.程序如下:(1)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液中固定6 min;(2)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液

核酸鉴定方法之浓度

核酸纯化在分子生物学实验室已经广泛应用。怎样获得高质量、高纯度的DNA或RNA样品对下游实验的顺利进行至关重要,因此,对纯化后的核酸进行鉴定也是*的步骤。本文简单的回顾学习一下核酸鉴定的方法。核酸鉴定包括:浓度/纯度鉴定+完整性鉴定 1.浓度/纯度鉴定 (1)紫外分光光度计:原理:由于核酸中的碱基都

外切核酸酶-Ⅲ-消化产生多组嵌套缺失突变体

            试剂、试剂盒 dNTP 溶液 乙醇 外切核酸酶Ⅲ缓冲液 核酸酶 S1 停止反应混合液 酚 氯仿 醋酸钠 外

外切核酸酶-Ⅲ-消化产生多组嵌套缺失突变体

逐步地从靶 DNA 的一端或另一端删除多个寡核苷酸的嵌套式缺失突变方法被用来确定功能性顺式调控元件的边界,早先曾作为指导 DNA 测序的模板。该方法依赖于核酸酶,这些核酸酶均以可预测的方式消化 DNA, 其中外切核酸酶 HI 是目前最好的。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J.

外切核酸酶-Ⅲ-消化产生多组嵌套缺失突变体

试剂、试剂盒 dNTP 溶液乙醇外切核酸酶Ⅲ缓冲液核酸酶 S1 停止反应混合液酚氯仿醋酸钠外切核酸酶ⅢKlenow 混合物连接混合物核酸酶 S1 反应混合物限制性内切酶凝胶靶 DNA仪器、耗材 微量离心管或带 U-型孔的微量滴定板水浴装置实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的成分清参阅附录

核酸离心机分类方法

核酸离心机分类方法有多种。1、按速度可分:核酸低速离心机和核酸高速离心机。2、按温控可分:核酸冷冻离心机和核酸常温离心机。3、按分离规模可分:小型核酸离心机和大型核酸离心机。4、按分离目的可分:核酸实验室离心机和核酸工业离心机。5、按结构可分:台式核酸离心机和落地式核酸离心机。6、按应用范围可分:专

核酸疫苗免疫接种的方法

核酸疫苗免疫接种的方法主要分为三种:①可产生高转染效率的途径,如肌肉接种;②转染效率虽不高,但是经常被用于实验动物接种的途径,如皮下、腹腔内接种;③转染效率不高,但有高水平的局部免疫监视,如皮肤、呼吸道接种。一般地,用注射器直接注射要求DNA为10~200ug枪注射要求的DNA量可少至亚纳克级。

核酸离心机分类方法

 核酸离心机分类方法有多种。1、按速度可分:核酸低速离心机和核酸高速离心机。2、按温控可分:核酸冷冻离心机和核酸常温离心机。3、按分离规模可分:小型核酸离心机和大型核酸离心机。4、按分离目的可分:核酸实验室离心机和核酸工业离心机。5、按结构可分:台式核酸离心机和落地式核酸离心机。6、按应用范围可分:

核酸离心机分类方法

核酸离心机分类方法有多种。1、按速度可分:核酸低速离心机和核酸高速离心机。2、按温控可分:核酸冷冻离心机和核酸常温离心机。3、按分离规模可分:小型核酸离心机和大型核酸离心机。4、按分离目的可分:核酸实验室离心机和核酸工业离心机。5、按结构可分:台式核酸离心机和落地式核酸离心机。6、按应用范围可分:专

核酸的提取方法有几种

DNA的提取方法有7种:酚抽提法、甲酰胺解聚法、玻璃棒缠绕法、异丙醇沉淀法、表面活性剂快速制备法、加热法快速制备、碱变性快速制备。核酸是一类生物聚合物,是所有已知生命形式必不可少的组成物质。核酸是脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的总称。脱氧核糖核酸(英文DeoxyriboNucleicAc

核酸的分离方法有什么

核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,为生命的最基本物质之一。核酸广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内,生物体内的核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。不同的核酸,其化学组成、核苷酸排列顺序等不同。根据化学组成不同,核酸可分为核糖核酸(简称RNA)和脱氧核糖核酸(简称DNA)。DNA是储存、复制和传递

核酸疫苗免疫接种的方法

核酸疫苗免疫接种的方法主要分为三种:①可产生高转染效率的途径,如肌肉接种;②转染效率虽不高,但是经常被用于实验动物接种的途径,如皮下、腹腔内接种;③转染效率不高,但有高水平的局部免疫监视,如皮肤、呼吸道接种。一般地,用注射器直接注射要求DNA为10~200ug枪注射要求的DNA量可少至亚纳克级。Fr

核酸定量分析方法

核酸定量分析 DNA 或 RNA(以260nm处的吸光值为基础) 1. 制备用蒸馏水稀释过的DNA 或 RNA 样品溶液 ( 典型稀释比为 1:100 或 5:500μl) 2. 使用紫外光源,在260 nm 处测定吸光值,也可以在280 nm 和230 nm 测定吸光值 (260/280 的光吸收

核酸电泳的步骤方法介绍

 核酸电泳是进行核算研究的重要手段,常用于和琼脂糖凝胶聚丙烯酰胺凝胶两种,凝胶电泳操作简单,是分离鉴定和纯化核算的一种常用方法,那么核酸电泳的步骤有哪些的呢?琼脂糖凝胶电泳的步骤:用透明胶将玻璃板或电泳装置所配备的塑料盘的边缘圈封,制成胶模,置水平工作台上;(2) 称取适量琼脂糖,置电泳缓冲液中,加

基因突变检测方法

基因突变检测方法:1.PCR-SSCP法是在非这性聚丙烯酰胺凝胶上,短的单链DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同构象,一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变。其基本原理为单链DNA在中性条件下会形成二级结构,这种二级结构依赖于其碱基组成,即使一个碱基的不同,也会形成不同的

核酸提取分离方法注意事项

核酸提取分离方法核酸提取分为传统方法和商业化试剂抽提。传统的方法一般会采用酚/氯仿抽提及乙醇沉淀来提取核酸。商业化试剂盒方法提取核酸,比较经典的是采用离心柱法,将硅胶膜固定在离心管中,通过离心力或者负压让液体通过硅胶膜,核酸就留在膜上。在经过洗涤、洗脱的步骤得到核酸。商业化试剂盒的应用还能避免试剂污