用CRISPR实现基因转录活体成像

最近,日本的一个研究小组开发出一种实时成像方法,用于内源基因转录活性和核定位的同步测量。研究人员用该方法来检测亚基因组范围的流动性变化,这取决于小鼠胚胎干细胞中多能性相关基因的活性。 Hiroshi Ochiai博士和他的同事Takeshi Sugawara博士、Takashi Yamamoto教授,建立了一种新的实时成像方法,被称为“Real-time Observation of Localization and EXpression (ROLEX)”系统。这个系统可让研究人员使用MS2转录成像和规律成簇间隔短回文重复(CRISPR)基因显像技术,同时测量内源基因的转录活性和核定位。 Ochiai博士指出:“仅现有的技术——如染色质构象捕获(3C)相关方法和使用高分辨率显微镜的荧光原位杂交(FISH)分析,很难探索基因组和基因表达随时间而发生的空间组织变化。动态信息的获取,对高阶基因调控的全面了解是必需的。因此,迫切需......阅读全文

细胞化学词汇基因系统发育

中文名称:基因系统发育英文名称:gene phylogeny定  义:通过比较DNA序列之间的差异建立的DNA分子之间的一种进化关系。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

外源基因在原核细胞中的表达系统

外源基因在原核细胞中表达是基因工程操作中最初取得成功的途径。1 原核生物基因表达的特点同所有的生命过程一样,外源基因在原核细胞中的表达包括两个主要过程:即 DNA转录成mRNA和 mRNA翻译成蛋白质。与真核细胞相比,原核细胞的表达有以下特点:①原核生物只有一种RNA 聚合酶(真核细胞有三种)识别原

外源基因在真核细胞中的表达系统

1. 真核生物表达的优越性和必要性① 真核生物具有转录后加工系统,可识别并删除基因中的内含子,剪切加工为成熟mRNA.②具备完善的翻译后加工系统,可进行糖基化、乙酰化等修饰,使蛋白形成正确的天然构型,因而真核生物表达系统产生的蛋白更接近天然状态,有利于其功能、生物活性的研究。③某些真核细胞可将基因表

《细胞系统》:基因数据噪音或可保护患者隐私

大型基因组数据库对于科学家寻找同疾病相关的遗传变异来说是必不可少的。不过,对于贡献了DNA的人来说,这会带来隐私风险。一项2013年的研究显示,黑客能利用网络上公开可用的信息,从被匿名的基因组数据中辨别出人们的身份。 为解决这些担忧,一个由美国麻省理工学院计算机科学家Bonnie B

《细胞系统》:基因数据噪音或可保护患者隐私

  大型基因组数据库对于科学家寻找同疾病相关的遗传变异来说是必不可少的。不过,对于贡献了DNA的人来说,这会带来隐私风险。一项2013年的研究显示,黑客能利用网络上公开可用的信息,从被匿名的基因组数据中辨别出人们的身份。  为解决这些担忧,一个由美国麻省理工学院计算机科学家Bonnie Berger

芯片上的类细胞系统可执行基因表达功能

  多年来,全球的科学家们一直梦想着制造一个完整的、功能齐全的人造细胞。据物理学家组织网3月18日报道,现在,以色列魏茨曼科学研究所材料与界面系的研究团队在这个方向取得了重大进展,他们在玻璃芯片上创建了一个二维的类细胞系统。这一系统是由细胞中的一些基本生物分子如DNA、RNA和蛋白质构成的

粒细胞系统系统特点

1、原粒细胞:又称髓母细胞。在正常情况下,只有骨髓中方能见到,但最多不超过2%,粒细胞白血病时可增多。圆形或微带椭圆形,直径18微米左右。浆量少,天蓝色,均匀一致,纯净无颗粒。核圆较大,占细胞2/3以上,染色质呈细沙粒状或粉末状,分布均匀,宛如一片薄纱。核膜甚薄,不易观察。核仁明显,通常2-6个,

粒细胞系统系统特点

1、原粒细胞:又称髓母细胞。在正常情况下,只有骨髓中方能见到,但最多不超过2%,粒细胞白血病时可增多。圆形或微带椭圆形,直径18微米左右。浆量少,天蓝色,均匀一致,纯净无颗粒。核圆较大,占细胞2/3以上,染色质呈细沙粒状或粉末状,分布均匀,宛如一片薄纱。核膜甚薄,不易观察。核仁明显,通常2-6个,较

病毒基因检测系统的系统特点

  1、DNA检测系统能提供诊断依据。使用基因芯片病毒检测系统,精确的诊断出导致泌尿生殖系统的致病微生物,为治疗感染疾病提供了科学的诊断依据。  2、生物基因疗法对顽固的感染症状效果不错。这种疗法特别针对病毒有极强的生物链的这个特点,从基因生物学的角度,直接破坏病毒基因生物链,达到治疗目的。

CHO细胞表达系统与酵母细胞表达系统比较

 CHO细胞表达系统与毕赤酵母表达系统是当前发展前景看好的两个表达系统,为了能够更加直观地对两个表达系统有一定的认识,特意在此篇中对两个表达系统作一定的比较,从而能够更进一步的对两个表达系统有更深的了解1.CHO细胞表达系统       (1)优点       CHO细胞属于成纤维细胞,既可以贴壁生

基因质谱分析系统

  基因质谱分析系统是一种用于预防医学与公共卫生学领域的分析仪器,于2012年6月19日启用  技术指标  可对4-30bp核酸片段进行分子量测定,每天分析完成>3000样本的1-36重RCR反应的检测和数据分析;一张芯片含384个孔,一次可任意选用1-384个孔,剩余孔可以分多次使用;数据读取完成

甲醇酵母基因表达系统

 1 甲醇酵母表达系统的特点  1.1 宿主  七十年代巴斯德毕赤酵母曾被用于生产单细胞蛋白(SCP),有很好的发酵基础,菌体密度可达100g/L干重。其生长培养液的组分包括无机盐、微量元素、生物素、氮源和碳源,廉价而无毒。它能在以甲醇为唯一碳源的培养基中快速生长,其中醇氧化酶AOX——甲醇代谢途径

常见的自杀基因系统

常见的自杀基因系统有以下几种:(一) tk-GCV系统病毒、细菌、真核细胞中都存在胸苷激酶(HSV-tk)。甘昔洛韦(GCV)是临床上用于治疗单纯疱疹的药物。GCV在胸苷激酶的作用下生成三磷酸GCV,能阻断DNA合成产生细胞毒作用。(二) CD-5-FC系统胞嘧啶脱氨酶基因(CD)存在于许多细菌和真

红细胞Rh系统

Rh血型系统是红细胞血型中最复杂的系统,其临床的重要性仅次于ABO血型系统。1.起源:1940年,Landsteiner和Wiener发现用恒河猴的红细胞免疫家兔所得抗血清能与约85%白种人红细胞发生凝集反应,认为这些人红细胞含有与恒河猴红细胞相同的抗原,即命名为Rh抗原。但Levine与Stets

红细胞血型系统

在红细胞血型系统中,以ABO血型系统发现最早,应用最广,与临床输血关系最密切,最重要,其次是RH系统。ABO血型的分类:红细胞上有A抗原,血清中有抗B抗体者为A型,红细胞上有B抗原,血清中有抗A抗体者为B型。红细胞上无A无B抗原、血清中有抗A抗B抗体者为O型,红细胞上有A有B抗原,血清中无抗A无抗B

浆细胞系统

1﹒原始浆细胞(plasmablast)胞体直径为14~18μm,圆形或椭圆形;胞浆量多,呈深蓝色或淡紫色,于近核处有淡染区,偶见空泡,无颗粒;胞核圆形,占细胞的2/3 以上,居中或偏位;核染色质呈粗颗粒网状,染紫红色,核仁2~4 个。在多发性骨髓瘤、浆细胞性白血病骨髓及血液中大量出现。2﹒幼稚浆细

巨核细胞系统

1﹒原始巨核细胞(megakaryoblast)胞体较大,直径为15~30μm,圆形或不规则形;胞浆量较少,呈不透明的深蓝色,有伪足突起,无颗粒;胞核圆形或不规则形,呈深紫红色,染色质较粗呈条索状,排列紧密,核仁2~3 个,淡蓝色,且不清晰。2﹒幼稚巨核细胞(promegakaryocyte)胞体明

红细胞系统

(一)正常红细胞系统1﹒原始红细胞(nor moblast)胞体直径为12~20μm,圆形或椭圆形,胞浆量少,深蓝色,不透明,有油画蓝感,偶有伪足突起,胞浆边缘着色深蓝,在核周围常形成淡染区;胞核圆形,居中或稍偏于一侧,染色质呈紫红色颗粒状,如串珠样排列,核仁1~2 个,大小不一,染浅蓝色。2﹒早幼

CloneSelect单细胞分离系统用于分选基因编辑的间充质干...

CloneSelect单细胞分离系统用于分选基因编辑的间充质干细胞 图1:CloneSelect f.sight单细胞分离系统 最近发表的一篇文章(Characterization of CRISPR/Cas9 RANKL knockout mesenchymal stem cell clone

痘苗病毒系统基因表达实验

重组痘苗病毒(VTF7-3)感染后的脂质体转染 两种重组痘苗病毒共感染细胞             实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质

基因系统发育的定义

中文名称基因系统发育英文名称gene phylogeny定  义通过比较DNA序列之间的差异建立的DNA分子之间的一种进化关系。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

痘苗病毒系统基因表达实验

实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质粒载体开始,然后用重组质粒通过脂质体介导转染已经被vTF7-3(可以持续表达T7 RNA聚合酶的痘苗病毒)感染的细胞。收获后,基因产物在细胞内的表达可以用脉冲标记的方法或用「重组痘苗病毒及其产物的鉴定实验」中叙述的方法分

David-Liu发布新prime编辑系统:在细胞中插入了完整的基因

  一种基于CRISPR的基因编辑技术称为twin prime editing,它可能是一种新的更安全的基因治疗方法。(Ricardo Job-Reese, Broad Communications)  麻省理工学院(MIT)和哈佛大学(Harvard)布罗德研究所(Broad Institute)

细胞化学词汇细胞癌基因

中文名称:细胞癌基因存在位置:正常的细胞基因组激活前作用:促进正常细胞生长增殖分化和发育激活后作用:使细胞发生恶性转化定义:存在于正常的细胞基因组中,与病毒癌基因有同源序列,具有促进正常细胞生长、增殖、分化和发育等生理功能。细胞癌基因:存在于正常的细胞基因组中,与病毒癌基因有同源序列,具有促进正常细

快速活细胞成像系统

  快速活细胞成像系统是一种用于材料科学领域的大气探测仪器,于2019年7月13日启用。  技术指标  有效像素数量512×512,单位像素面积16μm×16μm,最大读出速率70-1000 fps,光电转换量子效率90%(峰值),模/数转换器16 bit(全频率),冷却温度-65℃至-100℃;固

真核细胞表达系统1

自上世纪70年代基因工程技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今日已取得令人瞩目的成就 。随着人类基因组计划的完成,越来越多的基因被发现,其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基

真核细胞表达系统3

由于腺病毒易于培养、纯化,宿主范围广,故采用该类病毒构建的载体被广泛应用腺病毒载体的构建依赖于腺病毒穿梭质粒和包装载体之间的同源重组。但是哺乳动物细胞内的这种同源重组效率很低,利用细菌内同源重组法构建重组体效率会大大提高,即将外源基因插入到腺病毒穿梭质粒中,形成转移质粒,将其线性化后与腺病毒包装质粒

活细胞培养系统

活细胞培养系统能够为大多数细胞培养准确地提供所需的温度、湿度及CO2浓度。适用培养皿(35mm、50/60mm)、多孔板。同时系统也配备Z轴防漂移系统,可以自动补偿显微镜Z轴焦点漂移,始终红外检测目标细胞,保证长时间(几小时到数天)观察,视野始终处于清晰状态,并可实现细胞追踪功能。         

真核细胞表达系统2

在病毒感染晚期,由于大量外源蛋白的表达引起昆虫细胞的裂解,胞质内的物质释放出来,与 目的蛋白混在一起,从而使蛋白的纯化工作变得很困难,另外水解酶的释放会降解重组蛋白。为了克服以上这些困难,科学工作者先后尝试用丝蛾肌动蛋白基因启动子或杆状病毒ie-1基因启动子表达外源蛋白,但效果都不明显。Farr

细胞自噬系统介绍

自噬是近年来很热门的领域,做一下系统的介绍或讨论,内容:1) 什么是自噬?包括自噬的定义、形态学特征、分子基础、调控等2)自噬的意义自噬与细胞存活、细胞死亡、疾病、衰老等的关系3)怎么研究自噬?主要谈谈怎么证明细胞发生了自噬,即自噬的判断标准和各种研究自噬的方法及局限性。一、自噬的过程——从一张图片