流式细胞术在免疫学中的应用

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是二十世纪70年代发展起来的,是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型技术,能够对处在快速直线流动状态中的细胞或微球进行多参数的、快速的定量分析和分选,且能保持细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏。通过荧光探针的协助,它不但可以定量检测细胞膜、细胞质和细胞核中的各种细胞成份,而且可以研究细胞的各种功能状态,如细胞增殖、细胞凋亡等,广泛应用于科研和临床。本文仅对FCM在免疫学中的应用做一简要综述。1、流式细胞术原理 流式细胞仪的基本工作原理是采用激光作为激发光源,利用荧光染料与单克隆抗体结合的标记技术,通过计算机系统对流动的单个细胞或微粒的多个参数信号进行数据资料处理,从而对目的细胞或微粒进行详细的分析。FCM常用的荧光染料有FITC(异硫氰酸荧光素)、PE(藻红蛋白)、PI(碘化丙啶)等,常用的标记方法为......阅读全文

流式细胞术在免疫学中的应用

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是二十世纪70年代发展起来的,是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型技术,能够对处在快速直线流动状态中的细胞或微球进行多参数的、快速的定量分析和分选,且能保持细胞及细胞器或微粒

流式细胞术在移植中的应用

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流式细胞术在移植中的应用

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流式细胞术在PNH诊断中的应用

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流式细胞术在环境检测中的应用

随着流式细胞术的发展,流式细胞仪越来越多的使用在环境相关的研究及检测中。相对于传统的平板法与显微计数法,流式细胞术具有快速、灵敏、精确并能进行多参数分析的特点,且在后期使用成本上具有一定的优势。自 1993 年流式细胞仪首次运用于活性污泥中微生物群落结构分析以来,该技术逐渐成为空气、土壤、水等环境中

流式细胞术在PNH诊断中的应用

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流式细胞术在临床检验中的应用

付海龙(蚌埠医学院研究生部)赵亚萍(解放军82医院检验科)流式细胞术(flow cytometry,FCM)是近代细胞生物学、分子生物学、分子免疫学、流体力学、激光技术、电子计算机技术等高度结合和发展的结晶,是一种在功能水平上对单细胞或其他细胞粒子、抗原物质进行快速检测分析和分选的技术〔1〕。FCM

流式细胞术在血液学中的应用

  DNA倍体分析及细胞周期分析    在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞

流式细胞术在高等植物研究中的应用

流式细胞术(Flow cytometry,简称FCM)是20世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质及化学性质,如细胞大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测定并可分类收集的技术。该技术超越了传统显微分析技术,能在瞬间对大量细胞进行准确的分析。这种快速有效的细胞分析技术已广泛应用于

流式细胞术在血液学中的应用(二)

二、 流式细胞术在血液病学中应用(一)白血病的分类研究    B-cell  ALL    1.TdT  positive.    2.CD10  positive,  except  for  progenitor  B-cell  ALL.    3.HLA-DR  positive.    4

流式细胞术在血液学中的应用(七)

细胞凋亡研究细胞凋亡是细胞在基因控制下的有序死亡,在疾病发生、发展中有重要作用,因而研究细胞凋亡有重要意义。细胞凋亡检测方法很多,应用流式细胞仪技术可根据细胞在凋亡过程中发生一系列形态、生化变化从多个角度对细胞凋亡进行定性和定量的测定。 细胞形态变化:通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化来观察细胞凋亡

流式细胞术在血液学中的应用(四)

淋巴瘤免疫分型 目前淋巴瘤的分类方法已从LSG的形态学分类逐渐转变为REAL分类法, REAL分类法是以肿瘤发生源为基础的分类方法,在原来的形态学基础上加上免疫学分型后再加以分类,这种分类方法不仅能够推断肿瘤的发生源,对治疗也有指导意义。因此淋巴瘤的免疫分型越来越重要。如同白血病免疫分型一样,淋巴瘤

流式细胞术在血液学中的应用(一)

DNA倍体分析及细胞周期分析     在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞含有最

流式细胞术在血液学中的应用(三)

4.杂合型白血病   真正的双系列表型白血病是伴有t(9;22)或有11q23 MLL(myeloid/lymphoid or mixed lineage leukemia髓/淋系或混合性白血病)基因重排的病人,以往报道的许多杂合型白血病多是由于方法学问题不能排除非白血病细胞的干扰,或将非特异弱表达

流式细胞术在血液学中的应用(八)

细胞分选流式细胞仪能够分选某一亚群细胞,分选纯度>95%。目前细胞分选主要用于研究,临床应用较少。血液学应用最多的是造血干细胞的研究,最近随着造血理论的深入研究关于造血干细胞究竟是否都是CD34+细胞出现一些争论,实验研究证明, CD34-造血干细胞较CD34+造血干细胞更具造血潜能,这些实验研究所

流式细胞术在血液学中的应用(六)

白细胞吞噬功能测定粒、单核-巨噬细胞是机体免疫反应和免疫调节细胞中的重要成员。它们不仅具有吞噬功能,吞噬外来的微生物、肿瘤细胞等,同时又分泌多种生物因子参于免疫反应,此外单核-巨噬细胞对抗原物质的摄取、修饰、递呈等作用,是淋巴细胞的免疫功能必不可少的。因此检测白细胞吞噬功能对了解机体免疫状况有重要意

流式细胞术在血液学中的应用(一)

一、流式细胞术在基础血液学中的应用(一)血细胞的计数和分类研究    1.红细胞的计数、分类及其功能的研究   (1)循环的红细胞总量的测定:    生物素—逆转抗生物素蛋白—FITC系统的特异性和流式细胞  仪(FCM)的敏感性结合起来,建立了FCM测定人红细胞总量的方法,此方法具有标本用量少,无

流式细胞术在血液学中的应用(五)

红细胞疾病诊断 (一)网织红细胞测定    计数外周血中网织红细胞数量,对于评价骨髓红系造血及网织红细胞从骨髓到外周血的转送速率有重要意义。有核红细胞在成熟过程中,脱去细胞核后仍有少量RNA残留在细胞浆内,再经过约一天时间残留RNA完全消失,成为成熟红细胞。这种细胞浆内有残留RNA的红细胞称作网织

流式细胞术在CART治疗中的应用

过去十年,CAR-T治疗进展迅速,有阻碍,也有进步。CAR-T治疗效果要得到保障,流式细胞术少不了。流式在CAR T细胞疗法中有多种关键性的应用:1、在整个生产过程中监控CAR T细胞群体组成,并评估体内细胞的持久性和治疗效果在CAR T制造的前期阶段,流式细胞术可用于分析单采血液分离产品的成分,并

流式细胞术在血液学中的应用(二)

白血病免疫分型其临床意义 目前公认的系列特异性指标是:T淋巴细胞系--胞浆CD3(cCD3),B淋巴细胞系-- cCD22或cCD79,髓系---MPO 或cCD13,一般可先用他们区分细胞系列后再进一步分析某一系列亚型和分化阶段。1. ALL的免疫学分型1986年前分为普通型ALL(cALL)、未

流式细胞术在高等植物研究中的应用(一)

流式细胞术(Flow cytometry,简称FCM)是20世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质及化学性质,如细胞大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测定并可分类收集的技术。该技术超越了传统显微分析技术,能在瞬间对大量细胞进行准确的分析。这种快速有效的细胞分析技术已广泛应

流式细胞术在高等植物研究中的应用(二)

3.流式细胞术在高等植物中的应用3.1应用于植物中的特殊性由于植物细胞与动物细胞在结构上的差异,例如植物细胞具有细胞壁、特殊细胞器以及中央液泡等,因此流式细胞术应用于植物细胞时,在样品制备、染色、仪器的改造等方面都应适应植物细胞的上述特点。3.1.1制备植物染色体悬液的材料1984年De Laat和

流式细胞术在生殖医学中的应用

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流式细胞术在生殖医学中的应用

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SLAS-Discovery:高通量流式细胞术在药物开发中的应用现状

  SLAS Discovery上发表的一期特刊介绍了近期关于高通量流式细胞术(high-throughput flow cytometry,HTFC)在药物开发中的最新应用现状。  这期特刊由阿斯利康的Mei Ding博士和新墨西哥大学Bruce S. Edwards博士共同担任客座编辑,包含了一

流式细胞术的应用

(一)流式细胞术在细胞生物学中的应用流式细胞术最早被应用于生物学研究领域,就是生物细胞周期和动力学的分析。近年来,DNA倍体分析已经越来越广泛应用于临床和基础研究,发挥越来越重要的作用。1. 有利于肿瘤的早期诊断和鉴别诊断 良性肿瘤或良性增生时不会出现非整倍体细胞(DI>1),而恶性肿瘤则伴有相当数

关于流式细胞术在肿瘤学应用的内容介绍

  这是FCM在临床医学中应用最早的一个领域。首先需要把实体瘤组织解聚、分散制备成单细胞悬液,用荧光染料(碘化吡啶PI)染色后对细胞的DNA含量进行分析,将不易区分的群体细胞分成三个亚群(G1期,S期和G2期),DNA含量直接代表细胞的倍体状态,非倍体细胞与肿瘤恶性程度有关。  (1)发现癌前病变,