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如何用二氧化碳培养箱进行细胞复苏

(1) 准备 无菌超净台,酒精灯,75%酒精喷壶,二氧化碳培养箱,37℃水浴锅,离心机;培养瓶,含10%胎牛血清的完全培养基和基础培养基以及PBS磷酸缓冲液(提前放置超净台使平衡到室温),无菌工作服(白大褂),口罩,手套,记号笔(2) 步骤 1.穿好无菌工作服,带上口罩和手套,快速从液氮里取出冻存管,快速放进37℃水浴锅缓慢摇晃使细胞解冻,注意冻存管的封口膜不要破裂,防止污染。 2.解冻后用纸擦干冻存管表面的水滴,酒精喷壶喷洒适量75%酒精消毒冻存管封口处。 3.开超净台,点燃酒精灯燃烧片刻后(可提前准备),冻存管放超净台,换新手套,小心打开冻存管,避免污染,无菌吸管将1ml细胞全部吸出至5ml无菌EP管,补加9ml基础培养基稀释,1000rpm,离心5min使细胞沉淀,弃上......阅读全文

体外哺乳类细胞微核试验原理及注意事项(二)

4) 阳性对照阳性对照物包括染色体断裂剂和非整倍体剂。加S9时,断裂剂可以选用环磷酰胺和苯并(a)芘;不加S9时,断裂剂可以选用阿糖胞苷、丝裂霉素C、甲磺酸甲酯和4-硝基喹啉;非整倍体剂只用于不加S9时,可以选用秋水仙素和长春新碱。如果短期处理试验方案在S9存在和不存在两种条件下都选用断裂剂作为阳性

十分钟让你彻底了解二氧化碳培养箱(二)

4如何实现温度的精确控制维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度。不同种类的细胞对培养温度要求也不同,例如鱼、昆虫和两栖类细胞的适宜培养温度是25-28℃,哺乳动物细胞的适宜培养温度是35-37℃,发生转化的细胞则适合在高于40℃的条件下生长。人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这

体外哺乳类细胞基因突变(HGPRT)试验原理及注意事项

体外哺乳动物细胞基因突变试验是利用培养的哺乳动物细胞作指示生物的体外遗传毒理学试验,可用于检测有化学物质诱导的基因突变,适用的细胞系包括小鼠淋巴瘤细胞(L5178Y),中国仓鼠肺细胞(V79),中国仓鼠卵巢细胞(CHO),人类淋巴母细胞(TK6)等。这些细胞系,常用的遗传学终点是检测胸苷激酶(TK)

组织源性原代细胞培养实验室组建的基本要求

一、实验室设计1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,为

细胞培养攻略:细节决定成败

  培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。最好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。  那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧!  1.细胞生长的

细胞培养攻略:细节决定成败

培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。-好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。 那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧! 1

人胰腺腺癌细胞(BxPC-3)

细胞接收后的处理:1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,hao在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×

小鼠神经干细胞(C17.2)的培养操作规程及注意事项

小鼠神经干细胞(C17.2)细胞接受后的处理:1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给细胞拍照各2

体外哺乳类细胞基因突变(HGPRT)试验原理及注意事项-3

结果评价:阳性结果的判定:受试物组在任何一个剂量条件下的突变频率为阴性(溶媒)对照组的3倍或3倍以上,可判定为阳性。受试物组的突变频率增加,与阴性(溶媒)对照组比较具有统计学意义,并有剂量-反应趋势,则可判定为阳性。受试物组在任何一个剂量条件下引起具有统计学意义的增加并有可重复性,则可判定为阳性。阴

牛胚气管细胞培养常见问题及解决方案

牛胚气管细胞培养基及培养冻存条件准备:1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用

细胞形态异常,鱼骨图来帮忙(三)

那么我们继续分析根据鱼骨图鱼刺大小所代表的问题发生概率大小,接下来我们来谈谈实验操作过程中,有哪些因素会影响到我们的实验结果呢?操作过程操作过程又可细分为以下几类:操作人员人体皮肤表面平均带有103~106/cm2的微生物,污染物可能由于操作人员及穿着衣物带入。进出细胞房需穿着合适的实验衣及更换专用

细胞原代培养、传代培养、冻存和复苏

  实验原理  细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做再培养, 即将培养的细胞分散后,从一个容器以1:2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养,为传代培养,传代培养的累积次数就是细胞的代数。  细胞冻存及复苏

体外细胞的原代培养、传代培养、冻存和复苏

一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做再培养, 即将培养的细胞分散后,从一个容器以1:2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养,为传代培养,传代培养的累积次数就是细胞的代数。细胞冻存及复苏的基

体外细胞的原代培养、传代培养、冻存和复苏

一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做再培养, 即将培养的细胞分散后,从一个容器以1:2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养,为传代培养,传代培养的累积次数就是细胞的代数。细胞冻存及复苏的基

对培养的NK细胞不满意,是培养基的问题,还是试剂盒...

对培养的NK细胞不满意,是培养基的问题,还是试剂盒的问题?关于NK细胞培养的问题,不能只认为培养基不好或试剂盒不好,很多客户在培养过程中遇到接种密度的问题、补液程序的问题、血浆问题以及样本的问题,所以影响NK细胞培养效果的因素非常之多,那么在细胞培养不太满意的情况下,我们应该按以下原则进行排查。1、

对培养的NK-92mi细胞不满意,究竟哪里出了问题?

关于NK细胞培养的问题,不能只认为培养基不好或试剂盒不好,很多客户在培养过程中遇到接种密度的问题、补液程序的问题、血浆问题以及样本的问题,所以影响NK细胞培养效果的因素非常之多,那么在细胞培养不太满意的情况下,我们应该按以下原则进行排查。  1、血液样本问题首先确认样本的状态,理论上来讲外

OVCAR3细胞;人卵巢腺癌细胞

培养条件: 胎牛血清至终浓度为10%。环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;温度,37℃细胞冻存: 液氮冻存(冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO)细胞运输: 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25瓶)注意事项冻存细胞接收后的处理:1.干冰运输,

如何预防细胞培养的污染问题?

体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:1、从物品、用品消毒灭菌着手细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确

使用二氧化碳培养箱培养HCC827细胞

   冻存细胞接收后的处理:       1.干冰运输,收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏;       2.收到细胞后,若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联

细胞培养污染的预防

体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。 一般预防可从以下几方面着手:1、添加抗生素各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用

掌握了这些细节,师姐再也不用担心我养不好细胞啦~

很多小伙伴在养细胞的时候,总是会出现这样或那样的问题,很多时候,那是因为你没有注意以下的细节问题,现在我们一起来看看:细胞培养前的准备在您带上手套开始细胞培养之前, 先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足, 以免在开始实验后再次出入操作台,这样可以降低细胞污染的风险。细胞培养基也应先预热, 选择只预热

肿瘤细胞培养实验

肿瘤细胞培养实验 提高肿瘤细胞培养存活率和生长率的实验             实验方法原理 肿瘤组织及细胞在模

肿瘤细胞培养实验

肿瘤细胞培养实验可用于:(1)研究肿瘤的发生机理;(2)研究生物学行为;(3)研究抗肿瘤药物。实验方法原理肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃至繁殖、为研究癌变机理、抗癌药检测、肿瘤分子生物学提供大量的实验材料。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒培养液Hanks胰