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iRNA干扰GFP表达实验

实验概要本文介绍了iRNA干扰GFP表达实验的原理及方法步骤。实验原理RNA沉默是发生在植物(转录后基因沉默或共抑制)、动物(RNA干扰,RNAi)和真菌(消除作用)等真核生物细胞中的的特异性和高效率的mRNA降解机制。在哺乳动物细胞中,RNAi通常用于阻断特定基因的表达从而研究基因的功能。将靶向特定基因的大约21碱基长短的双链siRNAs(smallinterferingRNAs),或者是45—50-mer的发夹结构RNA(smallhairpinRNA,shRNA)转染到细胞。shRNA在细胞内会自动被加工成为siRNA,从而引发基因沉默或者表达抑制。通过质粒表达siRNAs同样可以抑制特定基因的表达。选用PolIII启动子启动编码shRNA(smallhairpinRNA)的序列。PolIII启动子总是在离启动子一个固定距离的位置开始转录合成RNA,遇到4—5个连续的U即终止,非常精确。当这种带有PolIII启动子和shR......阅读全文

免疫核糖核酸的制备及鉴定实验

实验概要本实验通过免疫动物,制备了免疫核糖核酸(iRNA),并进行了鉴定。实验原理iRNA是用某种抗原免疫动物后,从免疫动物的免疫活性细胞中提取出来的RNA。它具有传递相应抗原特异性免疫信息的能力,因而注入体内后,可发挥对该抗原的免疫清除作用。iRNA的免疫学作用机理目前尚无定论,一般认为iRNA具

免疫核糖核酸的制备及鉴定实验

实验概要本实验通过免疫动物,制备了免疫核糖核酸(iRNA),并进行了鉴定。实验原理iRNA是用某种抗原免疫动物后,从免疫动物的免疫活性细胞中提取出来的RNA。它具有传递相应抗原特异性免疫信息的能力,因而注入体内后,可发挥对该抗原的免疫清除作用。iRNA的免疫学作用机理目前尚无定论,一般认为iRNA具

活体动物体内光学成像(八)

关于技术应用42. 可以用荧光素酶基因标记干细胞吗?如何标记? 可以,标记干细胞有几种方法。一种是标记组成性表达的基因,做成转基因小鼠,干细胞就被标记了,从此小鼠的骨髓取出造血干细胞,移植到另外一只小鼠的骨髓内,可以用该技术示踪造血干细胞在体内的增殖和分化及迁徙到全身的过程。另外一种方法是用慢病

活体生物发光成像技术的最新进展

活体动物体内光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进

伊朗副总统确诊感染新冠肺炎,已有4个政坛人士确诊

  阿拉伯国有电视台(Al Arabiya)刚刚援伊朗伊斯兰共和国通讯社(IRNA)报道称,伊朗负责妇女和家庭事务的副总统玛苏梅·埃卜特卡尔(Masoumeh Ebtekar)的新型冠状病毒检测呈阳性。  据伊朗伊斯兰共和国通讯社(IRNA)2月27日报道,截至目前,该国境内已累计确诊245例新冠病

基因敲除的原理与方法

基因敲除可以说是基因组 学、细胞分离培养以及转基因技术的组合。那么基因敲除的原理是什么呢? 基因敲除的方法有哪些呢?在此,做个小结,以供大家学习。一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子 生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用D

基因敲除技术

一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被

关注细胞分析!首届微纳流细胞分析学术报告会京召开

  分析测试百科网讯 2018年9月25日,首届微纳流细胞分析学术报告会在北京召开,百余位业内专家学者参与了此次报告会。本次大会为期两天,同期在清华大学化学系举办“第5期微流控芯片质谱联用细胞分析讲习会”。会议围绕着微流控及细胞研究领域的最新研究成果进行交流与探讨,关注微流控细胞分析基础研究与应用开

温室土壤温湿度无线信息采集与监控系统的总体设计...

为达到节能环保的设计要求本系统设计采用太阳能供电,数据传输采用无线方式,这种方式可以不用在温室中大量布线,也便于下位机模块的一体化安装使用等。整个温室土壤温湿度无线信息采集与监控系统系统设计分为下位机和上位机2个部分。其中下位机负责温湿度的采集、显示、无线上传以及对电磁阀和通风电机的控制;上位机担负

基因技术专题-2

RNAi技术RNA干扰(RNA interference, RNAi)是近年来发现的研究生物体基因表达、调控与功能的一项崭新技术,它利用了由小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)引起的生物细胞内同源基因的特异性沉默(silencing)现象,其本质是siRNA与对应

3种常用基因功能验正方法简述

  科研人员在分析项目的过程中,碰到这样的问题:通过各种手段(选择清除分析、比较基因组学分析、转录组分析)获得的行驶某种功能的某基因,如果进行实验的验正呢?一般分为:基因上调(基因转染法)、基因下调(基因干扰法)后看蛋白表达水平、细胞功能改变、在体动物模型中相关功能的变化等。   相信大家也有

三种常用基因功能验正方法

科研人员在分析项目的过程中,碰到这样的问题:通过各种手段(选择清除分析、比较基因组学分析、转录组分析)获得的行驶某种功能的某基因,如果进行实验的验正呢?一般分为:基因上调(基因转染法)、基因下调(基因干扰法)后看蛋白表达水平、细胞功能改变、在体动物模型中相关功能的变化等。1、 RNA 干扰

3种常用基因功能验正方法简述

  科研人员在分析项目的过程中,碰到这样的问题:通过各种手段(选择清除分析、比较基因组学分析、转录组分析)获得的行驶某种功能的某基因,如果进行实验的验正呢?一般分为:基因上调(基因转染法)、基因下调(基因干扰法)后看蛋白表达水平、细胞功能改变、在体动物模型中相关功能的变化等。   相信大家也有

RNAi的作用机制及siRNA的合成方法

RNAi的作用机制及siRNA的合成方法RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double strandedRNA, dsRNA)分子在mRNA水平关闭相应序列基因表达或使其沉默的过程。dsRNA可以抑制不同类型细胞的靶向基因表达,用特异性的抗体几乎检测不到靶向

基因敲除技术概述(一)

1.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较成

基因敲除技术

一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较