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胰凝乳蛋白酶

用 SUPHEPA 测定 用 GLUPHEPA 测定 实验方法原理 实验材料 α-胰凝乳蛋白酶 试剂、试剂盒 三甲醇胺-NaOH 三甲醇胺-NaOH N-琥珀酰-L-苯丙氨酰对硝基苯胺 仪器、耗材 分光光度计 实验步骤 实验所需「试......阅读全文

胰蛋白酶的提取原理和方法步骤

[原理] 在动物胰脏中除了存在胰蛋白酶外,还有另外两种与胰蛋白酶性质相似的蛋白水解酶:胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶。在胰蛋白酶提取过程中,三者彼此很难分开。需采用合适的方法进一步分离纯化。 从动物胰脏中提取胰蛋白酶,一般是用稀酸将胰腺细胞中含有的胰蛋白酶原提取出来,然后根据等电点沉淀的原理

Science子刊:β5i在心脏肥大发展过程中的新作用

  病理性心脏肥大如果没有得到充分的治疗,最终会导致心力衰竭。一组研究人员报道的最新发现指出,在血管紧张素II(Ang II)处理过的心肌细胞和肥大心脏中,免疫蛋白酶体催化亚基β5i表达和活性显著增加,而且这种作用在心肌细胞和转基因小鼠中通过β5i过表达加剧。这表明了β5i在调节心脏肥大中的新作用,

Science子刊:β5i在心脏肥大发展过程中的新作用

  病理性心脏肥大如果没有得到充分的治疗,最终会导致心力衰竭。一组研究人员报道的最新发现指出,在血管紧张素II(Ang II)处理过的心肌细胞和肥大心脏中,免疫蛋白酶体催化亚基β5i表达和活性显著增加,而且这种作用在心肌细胞和转基因小鼠中通过β5i过表达加剧。这表明了β5i在调节心脏肥大中的新作用,

β5i在心脏肥大发展过程中的新作用

病理性心脏肥大如果没有得到充分的治疗,最终会导致心力衰竭。一组研究人员报道的最新发现指出,在血管紧张素II(Ang II)处理过的心肌细胞和肥大心脏中,免疫蛋白酶体催化亚基β5i表达和活性显著增加,而且这种作用在心肌细胞和转基因小鼠中通过β5i过表达加剧。这表明了β5i在调节心脏肥大中的新作用,因此

使用差示扫描量热法加速优化医用蛋白质制剂的...(二)

在研究溶液中的生物聚合物时使用 Malvern MicroCal™ VP-Capillary DSC(图 2)和Malvern MicroCal VP-DSC 系统。 Malvern MicroCal VP-Capillary DSC 系统专为筛选多个制剂的 Tm 设计,可实现较高的样品处理

分子生物学实验室内常见有毒物质及防护措施

  分子生物学实验室中研究对象主要是细胞,DNA,RNA和蛋白质。实验过程中我们常常要对这些实验对象进行观察,提取,裂解等操作。然而,要知道我们人体本身就是由细胞组成的,细胞内包括DNA,RNA,蛋白质。所以对这些实验对象进行操作时,使用的很多试剂也会对我们身体产生危害。今天,小编就为大家介绍一下分

胰蛋白酶(trypsin)纯化

[原理]胰蛋白酶与另外两种蛋白水解酶:糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)和弹性蛋白酶同时存在于胰脏中。由于胰蛋白酶、糜蛋白酶和弹性蛋白酶的酶蛋白分子在结构上及其它很多性质上的相似之处,往往在一般的制备过程中很难将它们彼此彻底分开,传统的分离、纯化技术难以达到十分满意的结果,但采用亲和层析技术,大大提高了分离纯

Western Blot,如何成功优化?

Western Blot 现在仍然是检测和分离蛋白最常用的一种实验方法,但是要想得到较好的结果并不容易,只有找到合适的实验条件并进行优化,才能以更少的时间得到更多的结果,达到事半功倍的效果!下面是 R&D Systems 品牌为您推荐的免疫印迹优化步骤和实验涉及参考数据:一抗浓度对实

植物蛋白质组学和糖基化(一)

 1. 前言与其他真核细胞一样,植物细胞中,糖基化通常发生在分泌蛋白质上,虽然在细胞质蛋白和核蛋白上也发现一些糖基化反应。根据寡糖部分和蛋白质骨架之间的连接方式,可将糖基化分为两种类型:N -糖基化和 O-糖基化。植物中 N-糖基化研究最多。1.1 N-糖基化与其他真核细胞一样,在植物细胞

goldbio蛋白酶抑制剂

  细胞裂解后,会释放蛋白水解酶,从而降低蛋白质产量。在细胞悬浮液中添加蛋白酶抑制剂可防止蛋白质提取过程中不必要的蛋白水解。Gold Biotechnology提供了多种蛋白酶抑制剂,这些蛋白酶抑制剂可满足您的研究需求。这些可逆和不可逆抑制剂对多种半胱氨酸和丝氨酸蛋白酶具有活性,并在提取过程中有效保

植物Plant胰凝乳蛋白酶(CTP)ELISA检测试剂盒使用说明

  植物(Plant)胰凝乳蛋白酶(CTP)ELISA检测试剂盒   使用说明书   检测原理   试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被胰凝乳蛋白酶(CTP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TM

植物Plant胰凝乳蛋白酶(CTP)ELISA检测试剂盒使用说明

  植物(Plant)胰凝乳蛋白酶(CTP)ELISA检测试剂盒   使用说明书   检测原理   试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被胰凝乳蛋白酶(CTP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TM

蛋白质分子量(protein molecular weight)的测定——葡聚糖凝胶过..

实验原理葡聚糖凝胶(Sephadex)过滤法测定蛋白质分子量的原理,主要是依据这种凝胶具有分子筛作用,一定型号的凝胶具有大体上一定大小的孔径。在一定的凝胶柱内,凝胶孔隙所占的体积称为内水容积Vi,凝胶颗粒间的自由空间所占的体积称为外水容积V0。当样品流经凝胶柱时,大于孔隙的大分子完全不滲入到凝胶内部

Promega在ASMS 2009上推出鉴定蛋白质的新途径

  Promega利用ProteaseMAX表面活性剂推出了一项创新简化的胶内酶切技术。该项技术给分析人员提供了以下几点好处:   节省时间:整个胶内酶切过程只需一个小时的时间   省去了萃取步骤:蛋白质分解和肽段回收一步完成。   更多的数据:该分解技术保持了原有肽段的信息。   

蛋白质提取过程中常用蛋白酶和磷酸酶抑制介绍

在与蛋白相关的检测中,最关键的一步便是蛋白质的提取。在提取的过程中,我们要经常加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的。 本文详细总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF、Leupeptin亮肽素、Aprotinin抑肽酶、Pepstatin胃蛋

蛋白质提取过程中常用蛋白酶和磷酸酶抑制介绍

 在与蛋白相关的检测中,zui关键的一步便是蛋白质的提取。在提取的过程中,我们要经常加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的。        本文详细总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF、Le

饶子和院士最新文章:新型病毒的关键弱点

  著名的分子生物物理与结构生物学家饶子和院士,其研究组主要研究方向是与重要病毒和肿瘤相关的蛋白质结构、功能以及创新药物的研究,近期其研究组针对去年源自中东地区,引发多个病例的新型冠状病毒展开了研究,指出这种新型病毒也有自己的“阿喀琉斯之踵”。  冠状病毒是一个能够导致感冒的病毒家族。在SARS发生

植物胰凝乳蛋白酶(CTP)ELISA检测试剂盒使用说明

使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被胰凝乳蛋白酶(CTP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰

胰凝乳蛋白酶_用 SUPHEPA 测定

实验材料α-胰凝乳蛋白酶试剂、试剂盒三甲醇胺-NaOH三甲醇胺-NaOHN-琥珀酰-L-苯丙氨酰对硝基苯胺仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」在 25℃。测定 405 nm 吸光值增加,对硝基苯胺的吸收系数为 ε405=10.2×103 l(mol · cm)展开&n

凝胶层析法(gel chromatography)测定蛋白质分子量

一、实验目的1. 了解凝胶层析的原理及其应用。2. 通过测定蛋白质分子量的训练,初步掌握凝胶层析技术。 二、实验原理 凝胶层析又称排阻层析,凝胶过滤,渗透层析或分子筛层析等。它广泛地应用于分离、提纯、浓缩生物大分子及脱盐、去热源等,而测定蛋白质的分子量也是它的重要应用之一。凝胶是一种具有立体

Nature Methods发布CRISPR新技术:CRISPR-X

  斯坦福大学遗传学系,药理学系的几位学者合作,开发出了一种为原位蛋白质工程重利用体细胞超突变的新技术—— CRISPR-X ,这将能帮助科学家们创建复杂的原始遗传突变文库,分析完善蛋白质工程。  这一研究成果在线公布在10月31日的Nature Methods杂志上,文章的通讯作者是斯坦福大学Mi

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斯坦福大学遗传学系,药理学系的几位学者合作,开发出了一种为原位蛋白质工程重利用体细胞超突变的新技术――  CRISPR-X ,这将能帮助科学家们创建复杂的原始遗传突变文库,分析完善蛋白质工程。这一研究成果在线公布在10月31日的Nature Methods杂志上,文章的通讯作者是斯坦福大学

这些食物中竟含有天然毒素!预防及解毒措施了解一下?

  毒物是指在一定条件下,小剂量作用于机体就能与机体发生物理或化学作用,导致机体正常生理机能被破坏而引起一系列病变,甚至造成死亡的物质。由于毒物进入机体,产生毒性作用,导致机体功能障碍而引起疾病或死亡的现象称为中毒。  食物中的毒素是一类常见的毒物。根据来源可以将食物中的毒素分为天然毒素、诱发毒素和

亲和层析法(affinity chromatography)纯化胰蛋白酶-2

本实验采用猪胰蛋白酶的天然抑制剂—鸡卵类粘蛋白作为配基.从猪胰脏的粗提液中分离纯化胰蛋白酶。鸡卵类粘蛋白是一种专一性很强的胰蛋白酶的抑制剂,对猪和牛的胶蛋白酶有很强的抑制作用。而对胰凝乳蛋白酶无抑制作用。在pH7.6~8.0的范围内,猪或牛胰蛋白酶能牢固地吸附在鸡卵类粘蛋白上,在 PH2.5

Nature子刊:慢性胰腺炎动物模型是如何开发的?

  波士顿大学口腔医学院的Andrea Geisz和Miklós Sahin-Tóth开发出一种T7D23A基因敲入小鼠,以填补此领域的空白。这种小鼠携带阳离子胰蛋白酶原(T7亚型)的杂合p.D23A突变,为胰腺炎的研究和治疗提供了出色的模型。  胰腺炎是因为胰蛋白酶的自身消化作用而引起的疾病,包括

酶的分离纯化方法介绍-1

生物细胞产生的酶有两类:一类由细胞内产生后分泌到细胞外进行作用的酶,称为细胞外酶。这类酶大都是水解酶,如酶法生产葡萄糖所用的两种淀粉酶,就是由枯草杆菌和根酶发酵过程中分泌的。这类酶一般含量较高,容易得到;另一类酶在细胞内产生后并不分泌到细胞外,而在细胞内起催化作用,称为细胞内酶,如柠檬酸、肌苷酸、味

生物大分子药物代谢消除途径及体外代谢研究方法进展

摘要由于理化及生物学性质的差异,生物大分子药物与传统小分子药物相比,药代动力学机制更加复杂,在体内表现出不同的吸收、分布、代谢、排泄过程。大分子药物一般不经CYP 450 酶代谢,其体内消除途径主要有肾小球滤过、酶水解、受体介导的胞吞消除和抗药物抗体介导的消除。近年来,除了常用的免疫分析法、放射性同

酶的分离纯化方法简介

酶的分离纯化方法简介生物细胞产生的酶有两类:一类由细胞内产生后分泌到细胞外进行作用的酶,称为细胞外酶。这类酶大都是水解酶,如酶法生产葡萄糖所用的两种淀粉酶,就是由枯草杆菌和根酶发酵过程中分泌的。这类酶一般含量较高,容易得到;另一类酶在细胞内产生后并不分泌到细胞外,而在细胞内起催化作用,称为细胞内酶,

蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术首先在1967年由Shapiro建立,1969年由weber和Osborn进一步完善。主要用于(1)蛋白质的分离(2)蛋白质的纯化。实验方法原理蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按1.4 g SDS/1 g蛋白质比例的

蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法

目的要求学会SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法原理。掌握用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量的操作技术。实验原理:SDS是十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate)的简称,它是一种阴离子表面活性剂,加入到电泳系统中能使蛋白质的氢键、疏水键打开,并结合到蛋白质分子上(在一定