Antpedia LOGO WIKI资讯

CRISPR/Cas9设计工具,让基因编辑不再高冷!

CRISPR/Cas9已经成为最常用的基因编辑系统。CRISPR/Cas9包括2部分:Cas9核酸内切酶和sgRNA(single guide RNA),sgRNA由天然的tracrRNA (transactivating crRNA)和crRNA (CRISPR RNA)融合而来。 使用CRISPR/Cas9工具进行基因敲除等基因编辑时,首先要进行sgRNA设计。理论上只要根据PAM序列(SpCas9识别的最佳PAM是5-NGG-3)对所需靶向的物种基因组进行扫描,即可设计所有可能的sgRNA。但如何设计合理有效的sgRNA则需要谨慎考虑,因为这将决定其基因编辑结果。 图1 CRISPR/Cas9系统[2] 随着近年来研究的不断深入,研究者对CRISPR/Cas9系统机制已有非常全面的了解。这些研究结果也促进了大量的sgRNA设计工具的出现[1,3],从而给研究者提供了快速、高效的sgRNA设计选......阅读全文

基因编辑最大隐患已被排除?第三代工具或迎专利之争

  V型CRISPR系统中的核心蛋白Cas12b(也被称C2c1),在过去很难在人类细胞中完成基因编辑,因为Cas12b蛋白家族的最适反应温度通常都比较高。张锋今天发表在《自然·通讯》上的文章提到,一种通过改造的Cas12b蛋白可以在常温,高效、高准确性地完成基因编辑。张锋在文献中描述到:这种BhC