快速可靠的甲基化分析,无需亚硫酸氢盐转化

在甲基化分析中,亚硫酸氢盐转化通常是必经之路。它将未甲基化的胞嘧啶转化成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变,之后再结合PCR、测序等技术分析甲基化状态。听上去似乎很简单,但要想获得漂亮的结果,却并非那么容易。转化效率如何?回收率如何?这都是需要考量和优化的因素。 最近,QIAGEN推出了一款新产品EpiTect Methyl II PCR Array System,无需亚硫酸氢盐转化,即可快速准确地检测单个基因或一组基因的DNA甲基化状态。 EpiTect Methyl II PCR Array System采用创新的MethylScreen技术,实现了单个基因以及疾病和通路聚焦的一组基因中CpG岛DNA甲基化的快速准确检测。此技术无需亚硫酸氢盐转化。通过一步简单的限制性内切酶消化以及实时定量PCR,22个或94个不同基因的DNA甲基化水平可利用DNA Methylation PCR Arra......阅读全文

什么是胞嘧啶?

胞嘧啶,学名为4-氨基-2-羰基嘧啶,是一种有机物,分子式为C4H5N3O。是核酸(DNA和RNA)中的主要碱基组成成分之一。胞嘧啶可由二巯基脲嘧啶、浓氨水和氯乙酸为原料合成制得。用作药物中间体。

胞嘧啶的基本用途

胞嘧啶核苷、胞嘧啶核苷酸均可作为升高白细胞的药物。 胞嘧啶是精细化工、农药和医药的重要中间体,特别在医药领域,主要用于合成抗艾滋病药物及抗乙肝药物拉米夫定,抗癌药物吉西他宾、依诺他宾以及5-氟胞嘧啶等,应用非常广泛。

胞嘧啶的性状描述

白色或类白色结晶性或粉末;溶于水,溶于酸和碱,微溶于乙醇,不溶于有机溶剂。

胞嘧啶的物理参数

熔点: 210.0~220.0℃比旋度:+31~+35°干燥失重:≤0.5%炽灼残渣:≤0.1%重金属:≤10ppm含量(UV):98.0~101.5%纯度(HPLC):≥99.0%

胞嘧啶的用途说明

药品合成原料和生化试剂。用于CTP、CDP-胆碱、2′、3′-二去氧胞苷、阿糖胞苷等的制备。

胞嘧啶的基本用途

胞嘧啶核苷、胞嘧啶核苷酸均可作为升高白细胞的药物。 胞嘧啶是精细化工、农药和医药的重要中间体,特别在医药领域,主要用于合成抗艾滋病药物及抗乙肝药物拉米夫定,抗癌药物吉西他宾、依诺他宾以及5-氟胞嘧啶等,应用非常广泛。

胞嘧啶的基本用途

胞嘧啶核苷、胞嘧啶核苷酸均可作为升高白细胞的药物。 胞嘧啶是精细化工、农药和医药的重要中间体,特别在医药领域,主要用于合成抗艾滋病药物及抗乙肝药物拉米夫定,抗癌药物吉西他宾、依诺他宾以及5-氟胞嘧啶等,应用非常广泛。

胞嘧啶的物理特性

熔点:>300℃(lit.)性状:白色或类白色结晶性粉末100℃失水,300℃时成棕色,320~325℃分解。1g产品能溶于130ml水,微溶于乙醇,不溶于乙醚。pH2时,最大吸收波长276nm,摩尔吸光系数10000,最小吸收波长238nm,吸光度比值A250/A260=0.48、A280/A26

胞嘧啶的基本信息

中文名称: 胞嘧啶核苷(胞苷)中文别名: 胞嘧啶核苷;胞苷;胞嘧啶核糖核苷英文名称: Cytidine英文别名: Cytosine β-D-riboside;Cytosine-1-β-D-ribofuranoside纯度: ≥99%(HPLC)CAS号: 65-46-3分子式: C9H13N3O5分

胞嘧啶的功能用途

胞嘧啶核苷、胞嘧啶核苷酸均可作为升高白细胞的药物。 胞嘧啶是精细化工、农药和医药的重要中间体,特别在医药领域,主要用于合成抗艾滋病药物及抗乙肝药物拉米夫定,抗癌药物吉西他宾、依诺他宾以及5-氟胞嘧啶等,应用非常广泛。

胞嘧啶的基本信息

简写为C。核酸中嘧啶型碱基之一。存在于DNA和RNA中。在植物DNA中,除胞嘧啶外,还有少量的5-甲基胞嘧啶。在DNA的双股螺旋中,一股链上的胞嘧啶与另一股链上的鸟嘌呤配对,分子间形成三个氢键。这种碱基互补对之间的氢键是DNA双螺旋结构稳定性的重要作用力之一。胞嘧啶核苷、胞嘧啶核苷酸均可作为升高白细

氟胞嘧啶的含量测定

取本品约0.1g,精密称定,加冰醋酸20ml与醋酐10ml,微温使溶解,放冷,照电位滴定法(通则0701)用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于12.91mg的C4H4FN3O。

氟胞嘧啶的检查方法

酸碱度取本品0.10g,加新沸过的冷水10ml溶解,依法测定(通则0631),pH值应为5.5~7.5。溶液的澄清度与颜色取本品0.10g,加新沸过的冷水0m1溶解后,溶液应澄清无色;如显色,与黄色2号标准比色液(通则0901第一法)比较,不得更深。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试

DNA-甲基化测序常用方法

随着高通量测序技术(NGS)技术的发展,使我们能够从全基因组水平来分析 5’甲基胞嘧啶及组蛋白修饰等事件,由此能够发现很多传统的基因组学研究所不能发现的东西,这就是所谓的“DNA 甲基化测序”!DNA 甲基化测序方法按原理可以分成三大类: 1、重亚硫酸盐测序; 2、基于限制性内切酶的测序; 3、靶向

DNA甲基化的概念和方式

DNA甲基化(methylation)是真核细胞正常而普遍的修饰方式,也是哺乳动物基因表达调控的主要表观遗传学形式。DNA甲基化后核苷酸顺序及其组成虽未发生改变,但基因表达受影响。尽管甲基化修饰有多种方式,被修饰位点的碱基可以是腺嘌呤的N-6位、胞嘧啶的N-4位、鸟嘌呤的N-7位和胞嘧啶的C-5位,

甲基化的检测方法

(1) 甲基化特异性的PCR(Methylation-specific PCR,MSP)用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到

甲基化检测方法介绍

(1) 甲基化特异性的PCR(Methylation-specific PCR,MSP)用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到

生化与细胞所DNA去甲基化机制研究有新发现

  高等生物的基因组DNA中除含有腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T)四种常见的碱基形式外,还含有胞嘧啶的修饰形式:5-甲基胞嘧啶(5mC),被称为第5种碱基。而且它可以进一步被氧化为5-羟甲基胞嘧啶(5hmC),也被称为第6碱基。这些修饰形式在表观调控中都具有重要的作用,但它们

甲基化的类型介绍

甲基化包括DNA甲基化和蛋白质甲基化。(1)DNA甲基化:脊椎动物的DNA甲基化一般发生在CpG位点(胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤位点,即DNA序列中胞嘧啶后紧连鸟嘌呤的位点)。经DNA甲基转移酶催化胞嘧啶转化为5-甲基胞嘧啶。人类基因中约80%-90%的CpG位点已被甲基化,但是在某些特定区域,如富含胞嘧

关于甲基化的类型的介绍

  甲基化包括DNA甲基化或蛋白质甲基化  (1)DNA甲基化。脊椎动物的DNA甲基化一般发生在CpG位点(胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤位点,即DNA序列中胞嘧啶后紧连鸟嘌呤的位点)。经DNA甲基转移酶催化胞嘧啶转化为5-甲基胞嘧啶。人类基因中约80%-90%的CpG位点已被甲基化,但是在某些特定区域,如富

关于甲基化的类型介绍

  甲基化包括DNA甲基化和蛋白质甲基化。  (1)DNA甲基化:脊椎动物的DNA甲基化一般发生在CpG位点(胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤位点,即DNA序列中胞嘧啶后紧连鸟嘌呤的位点)。经DNA甲基转移酶催化胞嘧啶转化为5-甲基胞嘧啶。人类基因中约80%-90%的CpG位点已被甲基化,但是在某些特定区域,如

甲基化的主要类型

(1)DNA甲基化:脊椎动物的DNA甲基化一般发生在CpG位点(胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤位点,即DNA序列中胞嘧啶后紧连鸟嘌呤的位点)。经DNA甲基转移酶催化胞嘧啶转化为5-甲基胞嘧啶。人类基因中约80%-90%的CpG位点已被甲基化,但是在某些特定区域,如富含胞嘧啶和鸟嘌呤的CpG岛则未被甲基化。这与

两篇PNAS:蛋白纳米孔检测DNA甲基化

  两个独立的研究团队利用通道蛋白实现纳米孔测序,成功鉴别了5-甲基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶。这两篇文章发表在同一期的美国国家科学院院刊PNAS杂志上。   基因组所蕴含的编码信息,包括DNA序列和核苷酸修饰两个部分。其中,动态的DNA甲基化模式,是基因表达的重要调控者,与细胞分化、胚胎发育和癌症

胞嘧啶核糖核苷的用途说明

药品合成原料和生化试剂。用于CTP、CDP-胆碱、2′、3′-二去氧胞苷、阿糖胞苷等的制备。

胞嘧啶核糖核苷的性状描述

白色或类白色结晶性或粉末;溶于水,溶于酸和碱,微溶于乙醇,不溶于有机溶剂。

胞嘧啶核糖核苷的物理参数

熔点: 210.0~220.0℃比旋度:+31~+35°干燥失重:≤0.5%炽灼残渣:≤0.1%重金属:≤10ppm含量(UV):98.0~101.5%纯度(HPLC):≥99.0%

氟胞嘧啶片的含量测定

照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定溶剂0.lmol/L盐酸溶液。供试品溶液取本品20片(0.25g规格)或10片(0.5g规格),精密称定,研细,精密称取适量(约相当于氟胞嘧啶0.1g),置250ml量瓶中,加溶剂约150ml,振摇使氟胞嘧啶溶解,并用溶剂稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤

胞嘧啶的结构和主要作用

胞嘧啶,学名为4-氨基-2-羰基嘧啶,是一种有机物,分子式为C4H5N3O。是核酸(DNA和RNA)中的主要碱基组成成分之一。胞嘧啶可由二巯基脲嘧啶、浓氨水和氯乙酸为原料合成制得。用作药物中间体。

氟胞嘧啶的基本性状

本品为白色或类白色结晶性粉末,无臭或微臭本品在水中略溶,在乙醇中微溶,在乙醚中几乎不溶;在稀盐酸或氢氧化钠试液中易溶。

氟胞嘧啶的鉴别方法

(1)取本品的水溶液(1→-100)5ml,加溴试液0.15ml,溴液的颜色即消失或减褪(2)取本品,加盐酸溶液(9→100)溶解并稀释制成每1m中约含10g的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401)测定,在286mm的波长处有最大吸收,吸光度约为0.71(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(