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上期小编为大家介绍了以单一看家蛋白作为定量Western Blot内参蛋白的分析方法，这次咱不得不说说以全蛋白为内参的分析方法。 期刊JBC（The Journal of Biological Chemistry）在Western Blot数据要求中指出，对于半定量蛋白表达的实验，最佳的内参为全蛋白内参，如果以看家蛋白为内参，需要提供其在实验处理中表达量恒定的实验证明。 全蛋白作为内参的优势在于: 1、目标蛋白的相对丰度为目标蛋白强度与全蛋白强度比，不再依赖于单一蛋白强度值。 2、敏感性好。 3、线性范围宽。 4、蛋白可视化。 5、更适用于低丰度表达蛋白。 如果考虑使用全蛋白作为内参，之前只有两种方法，一是使用考染胶，平行跑两块胶，问题在于很难保证重复性；二是使用丽春红染料进行印迹膜染色，问题在于稳定差，很难实现全蛋白定量，随着荧光蛋白染色技术的问世，全蛋白定量问题......阅读全文
Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被
在这个读图的时代，凡是能用一张图片描述清楚的问题都不是问题，如果不够，那就两张~ 比如这段：“姑娘相貌娇美，肤色白腻， 她身穿一件靛青织锦的上衣，颜色甚是鲜艳，但在她容光映照之下，再灿烂的锦缎也已显得黯然无光……” 用图片说就是： 是不是既简单又粗暴？ 同样的，一张好的Figure胜过千
实验概要免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术，在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物，然后利用抗原—抗体的特异性反应，从蛋白混合物中检测出目标蛋白，从而定量或定性地确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况。Western blot还可用于蛋白—蛋白、蛋白—DNA