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动物体内抑瘤实验——生物发光标记法

实验方法原理活体生物发光成像技术的原理：在小型哺乳动物体内利用报告基因（荧光素酶基因）表达所产生的荧光素酶蛋白与其小分子底物荧光素在氧、Mg2+存在的条件下消耗ATP发生氧化还原反应，将部分化学能转化为可见光能释放。因此只有在活细胞内才会发生发光现象。并且光的强度与标记细胞的数目线性相关。实验材料裸鼠试剂、试剂盒DMEM培养基胎牛血清胰酶荧光素底物紫杉醇注射液仪器、耗材Kodak多模式活体成像系统ZetePALS型激光动态光散射粒度仪实验步骤一、材料准备1. 动物：裸鼠9 只，6～8周龄，雄性；C57小鼠24 只，6～8 周龄，雄性；动物均为自由饮水采食。2. 细胞：MDA-MB-231人乳腺癌细胞系，使用荧光素酶基因标记。方法：用荧光素酶报告基因标记的质粒转染人乳腺癌细胞， 共转染的还有选择性标记基因，从而保证转染 细胞的稳定性，形成表达荧光素酶的肿瘤细胞株；B16 黑色素瘤细胞。二、实验步骤1.&nb......阅读全文