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活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用（二）

图5.EGFR在细胞中转运的实时记录。（a）示意图，用于解释如何利用FAPL探针来实时追踪EGFR相关的细胞膜转运过程。（b）COS7细胞中表达的EGFR用DRBG-488标记（绿色），溶酶体用lysosometracker（红色）标记。（c）对表达SNAP-EGFR–CFP的MDCK细胞进行共聚焦实时成像。SNAP-EGFR-CFP用DRBG-488进行标记。在5min时加入了EGF刺激细胞，每个1min拍摄一次荧光图像。相对于CFP的成像，DRBG-488能够更清楚的记录EGF刺激之后囊泡的形成及其在溶酶体里的聚集。为了能够消除自发荧光，更清楚的对更深的组织甚至是活体动物进行荧光成像，科学家们对近红外染料的研发从未止步过[16]。Johnsson等科学家最近基于sillion-rhodamine荧光基团，推出了一款新的细胞膜通透性的近红外染料（SiR）[17]。在未与SNAP-tag等标签结合之前，成聚集状或者与疏水结构非特......阅读全文