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光谱染色体核型分析

实验材料 AppliedSpectralImaging ( MigdalHaemekIsrael) 试剂盒组织样本试剂、试剂盒 组织培养基秋水仙胺柠檬酸盐KCl甲醇冰乙醇去离子甲酰胺20 X SCCHClPBS MgCl2分装标记探针二甲苯仪器、耗材 解剖刀和刀片 无菌培养皿组织培养瓶培养箱水浴锅离心管移液枪染色缸荧光显微镜实验步骤 一、探针已经标记好的商品探针以混合形式溶解在杂交液中。二、从组织中制备染色体1.在组织培养用的超净工作台中进行无菌操作,在无菌培养皿中,用刀片将组织切碎成细小的块。2.将细碎的组织块转入有足够培养基的、具有通气孔的组织培养瓶中;培养基要盖过平面放置的培养瓶底(通常 10~15 mL)。3.将培养瓶放入 CO2 培养箱中,静置培养 24 h。4.光镜下观察其生长状态。5.当达到要求的生长状态或培养时间时,向培养瓶中加入秋水仙胺至终浓度 l(ug/mL,在 CO2 培养箱中继续培养 2~3 h(见注释 ......阅读全文

微阵列—比较基因组杂交技术检测染色体异常

【摘要】近年微阵列一比较基因组杂交(microarraycomparativegenomichybirdization,microarray.CGH)技术被应用到临床细胞遗传学领域。该技术是选择DNA特殊片段作为靶,固化在载体上,形成密集、有序的分子微阵列。然后,从测试标本中提取DNA,将测试DNA

光谱染色体核型分析实验

基本方案             实验方法原理 光谱染色体核型分析(SKY)采用24种颜色对所有染色体进行涂染,在一次试验

光谱染色体核型分析实验

实验方法原理光谱染色体核型分析(SKY)采用24种颜色对所有染色体进行涂染,在一次试验中可以观察到每一条染色体。该技术以光谱成像和傅里叶光谱学原理为基础。对流式分选的染色体进行PCR标记,直接标记荧光素或间接标记半抗原。5种光谱学不同的纯色染料进行组合得到独特的染色体探针混合物。探针混合物与中期染色

简并寡核苷酸引物PCR (DOP-PCR)

实验方法原理 显微切割或流式分选的染色体经过PCR扩增制备整条染色体的DNA,被认为是对某条染色体全部涂染的高质量探针的首选途径。对于单个染色体、多色FISH(M-FISH)或光谱核型分析中所有24条染色体的涂染均是此种情况。下面提供的操作程序是简并寡核苷酸引物PCR(DOP-PCR)最原始操作程序

光谱染色体核型分析实验(一)

实验方法原理 光谱染色体核型分析(SKY)采用24种颜色对所有染色体进行涂染,在一次试验中可以观察到每一条染色体。该技术以光谱成像和傅里叶光谱学原理为基础。对流式分选的染色体进行PCR标记,直接标记荧光素或间接标记半抗原。5种光谱学不同的纯色染料进行组合得到独特的染色体探针混合物。探针混合物与中期染

简并寡核苷酸引物PCR (DOP-PCR)

基本方案             实验方法原理 显微切割或流式分选的染色体经过PCR扩增制备整条染色体的DNA,被认为是对

简并寡核苷酸引物PCR (DOP-PCR)

实验方法原理显微切割或流式分选的染色体经过PCR扩增制备整条染色体的DNA,被认为是对某条染色体全部涂染的高质量探针的首选途径。对于单个染色体、多色FISH(M-FISH)或光谱核型分析中所有24条染色体的涂染均是此种情况。下面提供的操作程序是简并寡核苷酸引物PCR(DOP-PCR)最原始操作程序的

多色荧光原位杂交实验

M-FISH 被成功地用于鉴别先天性疾病中的标记染色体或衍生染色体。近来该方法越来越多地被用于确认复杂核型中的多重染色体异常;在进行血液疾病的诊断时,M-FISH 在检测临界染色体重排中非常有用试剂、试剂盒DAPI 复染液乙醇SSC盐酸HClNP-40胰酶NaCl柠檬酸钠Spectra Vysion

盘点:分子诊断常用技术50年的沿革与进步

  一、基于分子杂交的分子诊断技术  上世纪60年代至80年代是分子杂交技术发展最为迅猛的20年,由于当时尚无法对样本中靶基因进行人为扩增,人们只能通过已知基因序列的探针对靶序列进行捕获检测。其中液相和固相杂交基础理论、探针固定包被技术与cDNA探针人工合成的出现,为基于分子杂交的体外诊断方法进行了

一文读懂分子诊断常用技术

  分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料,用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常,从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常,以确定受检者有无基因水平的异常变化,对疾病的预防、预测、诊断、治疗和预后具有重要意义。通俗

一文读懂分子诊断技术、PCR技术、基因测序技术

  分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料,用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常,从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常,以确定受检者有无基因水平的异常变化,对疾病的预防、预测、诊断、治疗和预后具有重要意义。通俗

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪(Flow Cytometry):镏金岁月50年

  自从50年前诞生至今,流式细胞仪(Flow cytometry)一直并仍然是无以伦比的高通量、高内涵的单细胞分析技术。  2015年11月,是流式细胞仪诞生50周年之时。人们可能会想象,一种如此长时间以前发明的技术应该到今天会是彻底地不同于当年,但是事实不然,它的基础原理与结构几乎没有什么改变,