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突破性进展:如何追踪抗生素耐药细菌抗性基因的来源?

根据世界卫生组织(WHO)报道,“抗抑菌剂基因的出现对于由细菌、寄生虫、病毒及真菌所引起的感染疾病的预防与治疗带来了很大的挑战,在后抗生素时代,看似普通的感染有可能扼杀一条生命不再是不切实际的幻想,而正逐渐变为现实”。 通常抗抑菌剂基因的获得是由细菌内可动遗传因子元件介导的致病菌间或者是致病菌和共生体间交换的结果,因此,获得抗抑菌剂基因所处的遗传环境对于了解抗抑菌剂基因的移动就显得非常重要。通过PCR或高通量二代测序的方法可以很容易检测到抗抑菌剂基因的存在,然而这些方法自身的一些局限性使得其很难精确地检测这些基因所处的遗传环境。而PacBio RS II SMRT单分子测序技术,利用其特有的读长优势可以克服这些局限从而追踪含抗抑菌剂因的致病菌在医疗环境中的传播。 细菌间遗传因子的水平转移是通过由细菌染色体所分离出来的质粒、小DNA分子来实现的。Conlan等科学家通过对2011年美国NIH临床诊断中心爆发的那次疫情......阅读全文

淋病的实验室诊断和药敏

淋球菌实验室检查包括涂片,培养检查淋球菌、抗原检测,药敏试验及PPNG测定,基因诊断。       (一)涂片检查:        取患者尿道分泌物或宫颈分泌物,作革兰氏染色,在

快速 PCR 定点突变实验

这种 PCR-SDM 方法的要点包括如下几个方面。1. 使用的模板浓度有所增加,这样就可以减少循环数,因此减少了非特异产物扩增的可能性。2. 加入了 Taq Extender, 扩增较长的 PCR 产物时产量和可靠性都有所提高。3. 使用 Dpm I 限制性内切酶,降低了母本分子的数量。4

快速 PCR 定点突变实验

            实验方法原理 这种 PCR-SDM 方法的要点包括如下几个方面。1. 使用的模板浓度有所增加,这样就可以减少循环数,因此减少了非特异产物扩增的可能性。2. 加入了 Taq Ext

快速 PCR 定点突变实验

试剂、试剂盒 ATPdNTP 溶液SDM 缓冲液Taq DNA 聚合酶克隆化的 Pfu DNA 聚合酶Taq Extender PCR 添加剂Dpn I 限制性内切酶T4 DNA 连接酶模板 DNAdsDNA 质粒LB 琼脂平板仪器、耗材 FALCON 2059 管子或替代物热循环仪水浴或适当的加热

载体构建实验常见问题大解析

大家是否在实验中经常遇到载体构建的各种问题,浪费大量的时间和精力,各种各样的问题让人头疼,海创科业小编作为科研老司机特意为各位科研君整理了载体构建实验常见问题及解决方法,希望能够帮助到大家。1.       PCR载体构建大部分时候都要通过PCR的方法获取目的片段,扩增

ESBLs

目前检测ESBLs的常用方法有双纸片协同试验(即阿莫西林双纸片协同试验与替卡西林双纸片协同试验,以NCCLS纸片表型确证试验测定结果为标准,筛选出产ESBLs)、纸片表型确证试验、琼脂稀释法确证实验、三维试验等。扩散法1.筛选试验:选用头孢泊肟、头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟或头孢曲松(每片含量均为30

抗菌肽叩响抗生素替代大门

  上世纪二三十年代以来,抗生素的发现和应用拯救了无数人的生命。如果说之前人类因其受益,那么,如今全世界则不得不致力于解决抗生素滥用所导致的后果——耐药细菌的出现及传播。   今年9月,出席联合国大会的193个成员国签署宣言承诺加强管制抗生素。在各国采取行动推动抗生素减量使用的同时,科学家们也在积极