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高分辨熔解曲线方法检测不同的DNA杂合体（二）

高分辨熔解技术对于区分相同扩增子内的不同的杂合体是必要的。与高分辨率的HR-1分析方法相比，LightCycler产生的熔解曲线并不能保证分离出杂合子。如图1所示，根据各自的4 对Tm值, 每个杂合子描绘出一条独特的熔解曲线。这些独特的熔解曲线的形状通过标准化的温度移位数据，以不同的图形形式表现出来。在图1A中，II因子和2个稀有杂合子（所有的家族１中的ＳＮＰｓ）可以清晰地从野生型中分离出来，并且也可以将它们彼此分离出来。在图２Ｂ中，Ｖ Leiden因子和3个稀有的杂合子（一个ＳＮＰ，一个１-bp的缺失和一个复合杂合子）同样有独特的曲线。如预期所示，单个的SNPs和１-bp的缺失(单个未配对的基因座位)。在图１Ｃ中，所有被检测的杂合子，包括标记的ＨＦＥ突变，３稀有的ＳＮＰｓ以及２个稀有的复合杂合子都可以被清晰得彼此分离出来，并且也能与野生型分离出来。在所有这些被研究的案例中，不同的杂合子都可以被区别出来，包括那些在同一个ＳＮＰ家......阅读全文