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高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法，这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题，如何解决这些问题呢? 1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决? 关于漂移问题： ①温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定； ②流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等； ③柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡； 关于快速变化问题 ①流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定； ②泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出； ③流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合； 2.液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么? ①筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子；......阅读全文
液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。 A、 峰拖尾 1、筛板阻塞 a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱
1 色谱柱柱压问题 色谱柱柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI之间(在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压
液相色谱作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确方式操作的话，就容易导致一些棘手的小问题。其中常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 【液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也
液相色谱作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确方式操作的话，就容易导致一些棘手的小问题。其中常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 【液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也
【液相色谱仪系统】液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。 常见问题及解决方法 一、柱压问题 柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好
液相色谱柱的色谱柱在使用一段时间后，会出现一定的常见故障，如果不能很好的判断并解决就会影响色谱柱的使用效果，从而影响样品的分析结果。当我们遇到这种情况要怎么办呢。 液相色谱柱常见的几种故障判断及排除方法： 1、当色谱柱压高于正常值，有三种情况： （1）柱端过滤器堵塞。排除方法：拆下过滤器用硝
1 高效液相色谱仪系统 液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。 2 常见问题及解决方法 高效液相作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确操作的话，就容
相信很多人都曾经因为基线波动或基线漂移问题而受到困扰，下文是一些经验总结，到底是哪些原因导致了基线走不好呢? 一、基线漂移(或上下波动)的原因 1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测
系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机 <>、自动进样器>、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自
89、我用的是C18柱，后面黑色的是我以前跑的图，前面是我现在跑的图形，完全一样的东西，只是流动相不是一批配的（流动相的成分没变），中间柱子别人用过了，峰型怎么发生了这么大的变化啊？可能的原因是什么啊？是不是柱子出了问题啊？ 答：从两个图对比很明显可以看出是柱效严重下降，且伴有肩峰。不同时间配
91.流动相中加入四氢呋喃对柱子有损害吗?我现在分析一样品流动相中用到20%的四氢呋喃才能把峰分到基线.但柱子只能用一个星期分离效果就不好了.请问是四氢呋喃损坏了柱子吗? 答：四氢呋喃(THF)是反相色谱中洗脱能力极强的溶剂，比甲醇和乙腈都强很多。在流动相中加入THF能改善某些
你在液相色谱使用过程中是不是会遇到各种各样的问题，别担心，本文针对色谱图的异常问题进行了整理，并给出解决方法，供大家参考。一个峰或几个峰是负峰解决方法：流动相吸收本底高；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。 所有峰均为负峰解决方法：信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；光学装置尚
液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。 1峰拖尾 原因和解决方法 1、筛板阻塞 a、反冲色谱柱 b、更换
现象原因解决方法压力异常（工作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方法）A、有压力显示，没有，流动相流动1、电源问题；接通电源开机2、保险丝被烧坏；更换保险丝3、控制器设定不正确或设定失败a、采取恰当的设定b、修理或更换控制器4、柱塞杆折断更换柱塞杆
3．流动相的pH值采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存
3．流动相的pH值 采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱
液相色谱(HPLC)法是以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的固定相的柱色谱分离技术。液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20%，而80%则需用液相色谱来分析
三、流动相1．流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面
溶剂的选择： 所有不锈钢、钛合金、及宝石PCTFE聚三氟氯乙烯、PTFE聚四氟乙烯、peek聚醚醚酮等材质制造的部件都长期浸泡在溶剂中。 必须使用与管道材质匹配的标准试剂盒缓冲盐溶液。特别注意类似高粘度、低沸点、有紫外吸收(UV-VIS检测器)、高折射率(RID检测器)及可挥发溶剂(脱气机)
HPLC系统一般由 输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置 等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理
2．泵的使用和维护注意事项 为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照下列注意事项进行操作： ①、防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方
流动相是影响液相色谱的关键因素。一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液，但是如何配制。选择配制的方法不同，分析结果特别是保留时间，是会有显著差别的。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、
开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况，大部分原因就是流动相没调好，那到底该怎么调，怎么选择呢？看完下文可能你就知道答案了。 01、由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离
液相色谱仪流动相的选用要求包括流动相性质要求、流动相选择、流动相pH值、流动相脱气、流动相过滤、流动相贮存、卤代溶剂应特别注意的问题和HPLC用水等方面。一、流动相性质要求：HPLC中，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k值减小；较弱的溶剂使溶质在填料表面的吸附增加，相应的容量因子k值
色谱流动相如何调整？还在模棱两可的看过来 开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况，大部分原因就是流动相没调好，那到底该怎么调，怎么选择呢？看完下文可能你就知道答案了。 秘诀1：由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水
糖分析是HPLC的典型应用之一,它广泛的应用在许多测试中用以确定膜的性能，一方面可以通过糖分析来确定膜去除糖分子的能力，另一方面也可检测膜固定化酶的活性。在分析中，目前通常采用薄层色谱法（TLC）、气体色谱法（GC）以及液相色谱法（HPL
一、流动相的选择 1、流动相的混合 双泵主要是在探讨流动相的配比或者梯度洗脱是比较方便，知道确切的液相色谱仪条件时，建议配好后使用的话，混合比较均匀，效果较好。 2、脱气 HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。 系统中气泡的产生：流动相本身
一）压力异常 操作压力的变化往往是故障的征兆。 A、没有压力显示，没有流动相流动： 原 因 解决方法 1、电源问题 接通电源，开机 2、保险丝被烧坏 更换保险丝 3、控制器设定不正确或设定失败 采取恰当的设定、、修理或更换控制器 4、柱塞杆折断 更换柱塞杆 5、泵头内有空气
主要是：压力异常、漏 液、谱图问题、进样阀的问题。一）压力异常 操作压力的变化往往是故障的征兆。A、没有压力显示，没有流动相流动： 原 因
高效液相色谱仪流动相的选用要求包括流动相性质要求、流动相选择、流动相pH值、流动相脱气、流动相过滤、流动相贮存、卤代溶剂应特别注意的问题和HPLC用水等方面。一、流动相性质要求：