cDNA文库的构建（一）
实验材料 λ噬菌体臂大肠杆菌菌株用于λ噬菌体的包装抽提物试剂、试剂盒 放线菌素 D二硫苏糖醇EDTATris-ClMgCl2反转录酶RNase 抑制剂用于 cDNA 合成的寡核苷酸引物poly(A)+RNA[a-32P]dCTPEDTA乙醇(NH4)2SO4β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸T4 噬茵体多核苷酸激酶大肠杆菌 DNA 聚合酶 I酚氯仿乙酸钠T4 噬菌体 DNA 聚合酶大肠杆菌 DNA 连接酶EcoRlβ-疏基乙醇溴酚兰仪器、耗材 微量离心管水浴箱SephadexG-50 离心柱过滤的压缩空气止血器或软管夹带有弯头的皮下注射针头无菌吸管聚乙烯管剪刀Sepharose CL-4B乙烯基泡沫管Whatman3 MM 滤纸实验步骤 阶段 1: 反转录酶催化合成 cDNA 第一链材料缓冲液和溶液将贮存液稀释到合适浓度。放线菌素 D:只在使用带有 RNaseH 活性的野生型 Mo-MLV 反转录酶时才需要用放线菌素 D。见第......阅读全文
cDNA
· cDNA Synthesis (Crawford Lab)mRNA can be converted into DNA (copy DNA, cDNA) by annealing oligo-dT to the 3' poly-A tail that occurs on
cDNA Libraries
cDNA Libraries Isolation of corresponding genetic information Instead of synthesizing a desired gene, can we used the amino acid information to
CDNA文库
CDNA文库（主要内容如下）· Construction of cDNA Library· Construction of Genome DNA Library· Library Screening OthersConstruction of cD
构建cDNA文库的层析柱cDNA分级
这一步稍不注意会影响成功性或影响获得的cDNA的片段分布特点。这一步的操作要小心，尤其要在加入cDNA之前通过反复悬浮和试滴保证柱子能正常工作，cDNA的加入和收集要精力集中。获得的每一级的cDNA量很少，检测时带型很暗，所以要用新鲜做的透明薄胶检测，根据检测结果一定要舍弃太短的cDNA（一般4
cDNA文库构建技术-cDNA链的反转合成
实验概要构建cDNA文库是一种获得目标基因并进一步进行基因重组，基因克隆的重要方法，而在该文库构建中有mRNA 逆转录出cDNA是一步极为关键的操作。mRNA的逆转录主要由MMLV、AMV两种逆转录酶催化合成cDNA，在这个逆转录过程中，模板mRAN及逆转录酶是两个最重要的影响因素。对于mR
cDNA文库构建技术-cDNA链的反转合成
构建cDNA文库是一种获得目标基因并进一步进行基因重组,基因克隆的重要方法,而在该文库构建中有mRNA 逆转录出cDNA是一步极为关键的操作。mRNA的逆转录主要由MMLV、AMV两种逆转录酶催化合成cDNA，在这个逆转录过程中，模板mRAN及逆转录酶是两个最重要的影响因素。对于mRNA来讲，一
cDNA 合成实验
试剂、试剂盒 二硫苏糖醇 dNTP 随机引物 来自方案 4 的 RNA 样品 RNasin 反转录缓冲液
Library cDNA Synthesis
Library cDNA Synthesis 1° cDNA Synthesis N.B: During 1° cDNA synthesis, all steps should be carried while wearing gloves and all solutions should e
Screening a cDNA Library
Screening a cDNA Library for use with HybriZAP zebrafish cDNA libraries Objective cDNA library screening allows detection of expressed genes for
cDNA合成技术
实验材料RNA试剂、试剂盒α32PdNTPmRNA甲基氢氧化汞β-巯基乙醇RNase抑制剂引物01igo dTTris-HClMgCl2KCl逆转录酶EDTA酚-氯仿乙醇琼脂糖HepesDTTDNA聚合酶核酸酶S1仪器、耗材SephadexG-100离心柱层析离心管恒温水浴锅电泳仪低温离心机实验步骤